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ANÁLISE DE MICRORGANISMOS MESÓFILOS E PSICOTRÓFICOS AERÓBIOS TOTAIS, :red…

- - - - Identificar os tubos com as diluições antes de iniciar
        
        Transferir 1mL, com uma ponteira estéril, da amostra para o próximo tubo de diluição (10^-2);
        
        Homogeiniza no vórtex.
        
        Transferir 1mL do primeiro tubo o segundo tubo de diluição (10^-3);
        
        Homogeiniza no vórtex.
        
        Repete quantas vezes forem necessárias para obter as diluições
      - Plaqueamento
        
        Profundidade
        
        2 placas identificadas para cada diluição (10^-4, 10^-5 e 10^-6).
        
        Usa a mesma ponteira se for plaquear da amostra mais diluída para a mais concentrada.
        
        Homogenizar rapidamente no vórtex a primeira diluição, abrir o tubo e transferir 1mL com uma ponteira limpa para a placa.
        
        Repetir para todas as diluições.
        
        :red_flag: Abrir o mínimo possível as placas
        
        Verter cerca de 20mL de meio de cultura (PCA – ágar padrão de contagem) esterilizado e na temperatura de 45ºC.
        
        Homogenizar 8 vezes cada placa, fazendo o movimento de 8 na bancada, sem encostar o líquido na tampa.
        
        Reservar até solidificar.
        
        Incubar com a tampa virada para baixo, em montes de 2, por 35-37ºC por 48h.
        
        Contagem da semeadura em profundidade
        Média da contagem x Fator de diluição
        
        Fator de diluição: inverso da diluição da placa.
        Deve-se contar placas onde a quantidade de colônias esteja entre 25-250 colônias por placa.
        
        Superfície
        
        2 placas identificadas para cada diluição (10^-4, 10^-5, 10^-6), com o ágar PCA já solidificado.
        
        Usa a mesma ponteira se for plaquear da amostra mais diluída para a mais concentrada.
        
        Homogenizar rapidamente no vórtex a diluição, abrir o tubo e transferir 0,1mL (100uL) com uma ponteira limpa para a placa.
        
        Repetir para todas as diluições.
        
        :red_flag: Abrir o mínimo possível as placas
        
        Para homogeneizar, usar a alça de Drigalski estéril, fazendo movimento de rodinho em toda a superfície da placa, até que o ágar absorva todo o inóculo.
        
        Incubar a 5-7ºC, de 7 a 10 dias, com as placas invertidas.
        
        Contagem da semeadura em superfície
        Média da contagem x 10 x Fator de diluição = UFC/g de amostra
        No plaqueamento em superfície, deve-se multiplicar o resultado por 10, visto que inoculou-se na placa uma quantidade 10 vezes menor, além de multiplicar pelo fator de diluição.
- - - - Homogenizar rapidamente no vórtex a diluição, abrir o tubo e transferir 0,1mL (100uL) com uma ponteira limpa para a placa.
        
        Repetir para todas as diluições.
        
        :red_flag: Abrir o mínimo possível as placas
        
        Para homogeneizar, usar a alça de Drigalski estéril, fazendo movimento de rodinho em toda a superfície da placa, até que o ágar absorva todo o inóculo.
        
        Incubar a 25ºC, de 3-5 dias, com as placas não invertidas.
        
        Fator de diluição: inverso da diluição da placa.
        Deve-se contar placas onde a quantidade de colônias esteja entre 15-150 colônias por placa.
        
        Contagem da semeadura em superfície
        Média da contagem x 10 x Fator de diluição = UFC/g de amostra
        No plaqueamento em superfície, deve-se multiplicar o resultado por 10, visto que inoculou-se na placa uma quantidade 10 vezes menor, além de multiplicar pelo fator de diluição.
      - Método APHA: ágar PDA + ácido tartárico 10%
        
        A infusão da batata estimula a produção de esporos em bolores e produção de pigmentos em determinados dermatófitos.
        
        Adiciona-se ácido tartárico ou ácido lático para inibir crescimento de bactérias.
      - Método ISO: ágar DRBC (ágar dicloran rosa bengala cloranfenicol)
        
        É utilizado principalmente em alimentos com atividade de água acima de 0,95.
        
        Adiciona-se dicloran e rosa bengala para inibir parcialmente o crescimento da colônias de fungos dos gêneros Mucor e Rhizopus que crescem muito.
        
        Adiciona-se cloranfenicol para inibir crescimento de bactérias.
        
        Método ISO: ágar DG18 (ágar dicloran glicerol)
        
        É utilizado principalmente em alimentos com atividade de água abaixo de 0,95, principalmente para leveduras osmofílicas e fungos filamentos osmofílicos.
        
        Adiciona-se dicloran e para inibir parcialmente o crescimento da colônias de fungos, e glicerol 16% para diminuir a atividade de água da cultura.
        
        Adiciona-se cloranfenicol para inibir crescimento de bactérias.