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BIOTECNOLOGIA DEL ADN DE COMBINACION EN EL CAMPO DE LA MEDICINA, image,…
BIOTECNOLOGIA DEL ADN DE COMBINACION EN EL CAMPO DE LA MEDICINA
GENOMA HUMANO
el genma humano contiene 3000 millones de pares de bases
PROYECTO GENOMA HUMANO
identificacion de secuencias de nucleotidos normales y mtantes en el ADN, diagnostico prenatal de enfermedades geneticas y tratmiento con terapia genetica
ENDONUCLEASAS DE RESTRICCION
● Son enzimas bacterianas
● Enzimas de restricción
● Digieren el ADN de doble hebra (ADNdh) en fragmentos pequeños.
● Análisis del ADN
● Las enzimas de restricción de utilizan para obtener segmentos de ADN.
FRAGMENTOS DE RESTRICCION
especificidad de las endonucleasas de restriccion
● Reconocen segmentos cortos de ADNdh
● Las secuencias son diferentes para cada enzima de restricción.
● Son palíndromos
● Exhiben una simetría rotacional doble.
● La secuencia se mantiene igual
Nomenclatura
● Enzima de restricción.
● Se nombra por el organismo que se aisló.
● 1ra letra del genero de la bacteria.
● 2 letras siguientes del nombre de la especie de la bacteria.
● Tipo de cepa
Extremos cohesivos y romos
● Las enzimas de restricción digieren el ADNdh
● Producen un grupo 3’-hidroxilo en un extremo
● Y un grupo 5’-fosfato en otro
● Algunas endonucleasas de restricción, como la Taq l
sitios de restriccion
● Endonucleasas de restricción rompen el ADNdh en fragmentos de tamaños diferentes
● Reconoce una secuencia especifica.
● Produce muchos cortes en la molécula de ADN
CLONACION DEL ADN
la introduccion de una molecula de ADN extraño en una celula que esta replicando permite la clonacion o amplificacion
VECTORES PROPIEDADES
● Debe ser capaz de replicarse de manera autónoma dentro de una célula hospedadora
● Debe contener al menos una secuencia de nucleótidos específica reconocida por una endonucleasa
● Debe llevar al menos un gen que confiera la capacidad para seleccionar el vector, como un gen de resistencia a antibioticos
SONDAS
se utilizan para identificar el clon de la genetica o la banda de gel que contiene el ADN diana
POLIMORFISMO DE LA LONGITUD DE LOS FRAGMENTOS DE RESTRICCIÓN
POLIMORFISMO
Es un cambio en el genotipo que puede no causar ningun cambio en el fenotipo o un cambio que no es perjudicial aumenta la suceptibilidad a la enfermedad o raramente provoca la enfermedad
Los polimorfismos ocurren en el 98% del genoma que no codifica proteínas.
El PLFR puede utilizarse para detectar variaciones genéticas humanas (en
presuntos padres o tejido fetal)
REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA
● Permite la síntesis de millones de copias.
● Amplifica secuencias de ADN de cualquier fuente.
ANALISIS DE LA EXPRESION GENETICA
EXPRESIÓN GÉNICA
● Permite analizar los productos de la expresión génica.
● El ARN mensajero y las proteínas.