ENSAYO COMETA
Ostling y Johanson, 1984, desarrollaron una técnica de electroforesis en microgeles para detectar el daño al ADN a nivel de células individuales.
En 1988, Singh cols.y su técnica en microgeles que involucra la electroforesis en condición alcalina (pH
13) para detectar el daño al ADN en células individuales
En estas condiciones de pH la incrementada
migración del ADN es asociada con elevados
niveles de rupturas de simples cadenas (RSC)
asociadas con sitios de reparación por escisión incompletos y sitios l biles al lcali (SLA). Como la
mayoría de los agentes genotóxicos inducen en mayor
magnitud RSC y/o SLA que RDC, se produce la identificación de los agentes genotóxicos. Dos años más tarde Olive,1990, introdujo otra versión alcalina
de este ensayo, en la cual la electroforesis del
ADN se ejecuta a pH 12,3, con esta variante se detectan
SLA convertidos en RSC
Resinas compuestas
Las resinas compuestas son usadas para una variedad
de aplicaciones en odontologÍa, están conformadas por una matriz polimérica, un metacrilato, un relleno de refuerzo de vidrio radio opaco, un agente de unión Silano que une la matriz con el relleno y promotores
o moduladores de polimerización. El monómero predominante es el bis-GMA el con una alta viscosidad, por lo tanto es mezclado con otros monómeros
como TEGDMA y UDMA
Monómeros dentales
Su grado de conversión es un determinante importante de las fuerza físico- mecánica del polímero resultante, poseen alta permeabilidad, mayor absorción de agua, mayor microfiltración, mayor liberación de monómeros residuales y, por lo tanto, menor biocompatibilidad. La polimerización
es inhibida por varios factores, tales como la
presencia de oxígeno, la presencia de agua proveniente de la dentina,entre otros .
Inducción de genotoxicidad causada por los
monómeros dentales
El ADN es el blanco molecular de los componentes de los materiales dentales resinosos, ya que sus efectos
genotóxicos han sido detectados en bacterias y células de animales mostrando la interacción entre el ADN y los monómeros residuales o metabolitos asociados, no se encontró inducción de mutación genética causada por el Bis-GMA y el UDMA, no se detectaron mutaciones genéticas con los monómeros HEMA y MMA, pero altas concentraciones de HEMA provocó mayores niveles de formación de micronúcleo indicando aberraciones cromosómicas in vitro en los estudios de Schweikl. El monómero bifuncional TEGDMA causa efectos mutagé nicos a dosis-dependiente en cultivo de cé lulas de animales, además la frecuencia de mutación genética aumenta más de 10 veces.
Daño al ADN y regulación del ciclo celular
El ADN mitocondrial y genómico son el blanco principal
para agentes como EOR, luz ultravioleta, radiación
iónica y sustancias químico-terapeuticas.
El comonómero TEGDMA ha sido mostrado por
Schweikl et al. como el causante de acumulación
reversible de células de la línea V79 en fase G2, probablemente debido a la falta de un punto de control
funcional en la fase G1 en esta línea celular.
En un estudio de Wisniewska evaluó a acción conjunta
del TEGDMA y UDMA sobre células de hamster,
encontrando que estos monómeros causan por
separado una inducción de daños citotóxicos y genotóxicos, sin embargo su asociación no incrementa
su acción dañina