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PRÁCTICA No. 7: REACCIONES DE AGLUTINACIÓN - Coggle Diagram
PRÁCTICA No. 7: REACCIONES DE AGLUTINACIÓN
Método de aglutinación en placa
Dejar atemperar los reactivos (KIT Comercial) y las muestras de suero.
Depositar 50μL de la muestra a ensayar y 1 gota (50μL) de cada control
(positivo y negativo) en círculos separados, en una placa de cristal para reacciones de aglutinación.
Añadir una gota (50μL) de antígeno próxima a la muestra a ensayar (con
una separación aproximada de 2-3 mm).
Mezclar con ayuda de un palillo, procurando extender la mezcla por toda la
superficie interior del círculo.
Mezclar durante 1 minuto
Reportar los resultados observados (aglutinación).
(Usando un suave movimiento de vaivén).
Es importante que mezcle el reactivo antes de
utilizar.
La sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas.
Método de aglutinación en tubo
Preparar una serie de tubos, rotulándolos tal como sigue:
Preparar 2 tubos más para control positivo y negativo, colocando 0.1 mL de
Control (positivo o negativo, respectivamente) y 0.9 mL de SSF (0.9%).
Añadir una gota (50μL) de antígeno a cada tubo.
Agitar e incubar los tubos a 37 °C durante 24 horas
Método de aglutinación en placa
Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación inmediatamente
después de agitar la placa y comparar los resultados con los sueros control.
Los resultados obtenidos en el método de titulación en placa, son aproximadamente
equivalentes a los que se obtendrían en el método de aglutinación en tubo con diluciones del suero 1/20, 1/40, 1/80, 1/160, 1/320 respectivamente.
Cualquier resultado positivo es aconsejable confirmar el título mediante el método de aglutinación en tubo.
Método de aglutinación en tubo
Examinar macroscópicamente el modelo de aglutinación y comprar los resultados con los
obtenidos en los tubos control.
Se considera como resultado positivo cualquier grado de aglutinación parcial o completa, con diversos grados de clarificación del sobrenadante.
El control positivo debe mostrar aglutinación parcial o completa.
El control negativo no
debe mostrar ningún tipo de aglutinación.
El título de la muestra se define como la dilución mayor que la muestra
resultado positivo.
