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ÁCIDOS NUCLEICOS Y PRUEBAS GENÉTICAS, image, NOMBRE: JULIO CESAR COLQUE…
ÁCIDOS NUCLEICOS Y PRUEBAS GENÉTICAS
ESTRUCTURA ÁCIDOS NUCLEICOS
Polímero formados por unidades de nucleótidos. Cada nucleótido está integrado por un azúcar
pentosa, una base nitrogenada y un grupo fosfato.
En el ARN de ribonucletidos tienen el azúcar ribosa, mientras que los desoxirribunucleotidos
contienen el azúcar desorribosa.
ARN
AZÚCAR RIBOSA
ADENINA
CITOSINA
GUANIANA
URACILO
Una cadena RIBONUCLEÓTIDO
ADN
AZÚCAR DESORRIBOSA
ADENINA
CITOSINA
GUANINA
TIMINA
Dos cadenas DESOXIRRIBONUCLEÓTIDOS
Disposición antiparalela, pues en un extremo se encuentra la terminación de nucleotico 3 mientras que en la otra se encuentra el extremo 5
Contiene la información genética con la que se elaborarán las proteínas del
organismo.
Existe otras nucleotidos que llevan acabo diferentes funciones
ADP (Adenosis Difosfato), precursor del ATP, importante fuente de energía química de la célula
ATP (Adenosis Trifosfato), principal fuente de energía química de la célula.
NAD (Nicotin Adenin Dinucleotido), su función es la recepción y donación de hidrógenos durante las reacciones químicas de transferencia de energía
NADP (Nicotin Adenin Dinucleotido Fosfato), permite la reducción del dióxido de carbono a fosfogliceroaldehido.
FAD (Flavin Adenin Dinucleotido), actúa como aceptor/donador de hidrogeniones
BASES NITROGENADAS
PURINAS
ADENINA
CITOSINA
GUANINA
TIMINA
PIRIMIDINAS
ADENINA
CITOSINA
GUANINA
URACILO
DESNATURALIZACIÓN Y LA HIBRIDACIÓN
DESNATURALIZACIÓN
Rompe los enlaces de hidrógeno que mantienen unidas las bases
HIBRIDACIÓN
Regenera los pares de bases para formar la doble cadena
LA EFICACIA DE LA HIBRIDACIÓN DEPENDE
La concentración del ADN
El tiempo de hibridación
La composición de bases del ADN
Los pares de bases A-T sólo forman 2 puentes de hidrógeno
Las condiciones de baja estringencia
Temperatura de la reacción
La concentración de sal de la mezcla de reacción
Identificación de fragmentos de ADN
Las sondas son fragmentos sintéticos de ADN de hebra simple (oligonucleótidos) que tienen una longitud de 12 a 26 nucleótidos, se utilizan para detectar secuencias específicas de ADN gracias a que hibridan porque son complementarias
Electroforesis
Método estándar para separar, identificar, y purificar fragmentos de ADN, a través de un gel de agarosa o poliacrilamida
Análisis de imágenes
Sistema TYPHOON 9410
Escáner diseñado para realizar la detección y análisis de diferentes imágenes obtenidas de ensayos con marcaje fluorescente principalmente.
Síntesis de ADN
Se lleva a cabo mediante una clase de enzimas llamadas ADN polimerasas, las cuales son capaces de sintetizar ADN de cadena sencilla
ADN polimerasa
Necesita
Un molde o patrón de ADN de hebra simple
Un iniciador o primer de ADN de cadena sencilla
Nucleótidos (dNTP’s) para formar la nueva hebra de ADN.
ENZIMAS IMPORTANTES
ADN ligasas como la T4 ADN ligasa
CINASAS, como la T4 Polinucleotido
TRANSFERASA
Extracción del ADN de las células
IMPLICA
Lisis de la membrana celular utilizando Tritón 100X u otro detergente
Centrifugación para obtener un botón y / lavado de los núcleos
Lisis de los núcleos usando Tween 20, u otro detergente como el duodecil sulfato de sodio.
Remoción de las proteínas unidas al ADN con proteinasa K o con pronasa.
Destrucción de la proteinasa K con calor.
Precipitación del ADN con alcohol isopropílico o etanol absoluto.
DETECCION DE MUTACIONES EN LOS GENESKRAS Y p53 ASOCIADOS CON LA SUSCEPTIBILIDAD AL DESARROLLO DE CÁNCER
El cáncer, neoplasia o tumor, puede considerarse una enfermedad genética que se desarrolla en organismos superiores, en la mayoría de los tejidos y en todo tipo de células somáticas.
CICLO CELULAR
Es la rutina metabólica que realiza una célula para multiplicarse por medio de una red de eventos bioquímicos y moleculares
FASE G0
FASE G1
FASE S
FASE G2
FASE M
La fase G0 por factores de crecimiento pasa a la fase G1, S, G2 y M para tener una división completa. Una vez que el estímulo del factor de crecimiento desaparece o por medio de factores de diferenciación, la célula regresa a la fase G0.
Genes responsables del cáncer
TIPOS DE GENES SUPRESORES
Los factores inhibidores del crecimiento celular
Los receptores de estos factores inhibidores o de hormonas que frenan el crecimiento celular.
Las proteínas citoplasmáticas que intervienen en los sistemas de transducción de señales acoplados a los receptores anteriores
Los factores de transcripción que dirigen la expresión de genes cuyos productos proteicos frenan el ciclo celular o producen apoptosis
Las proteínas que frenan el ciclo celular o producen apoptosis
Genes supresores de tumor y oncogenes
ONCOSUPRESORES
Codifican proteínas que actúan deteniendo la proliferación o bien induciendo la apoptosis. Cuando una mutación del gen genera una proteína no funcional o impide su síntesis, la proliferación pierde su control o bien la apoptosis nunca tiene lugar
TÉCNICAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR BÁSICAS PARA EL ESTUDIO DE GENES REALCIONADOS CON CÁNCER
Extracción de ADN
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Electroforesis
Secuenciación (Método enzimático o de didesóxidos)
IDENTIFICACIÓN HUMANA CON FINES DE EXCLUSIÓN DE PATERNIDAD
Criterios convencionales de identificación humana
Descripción de los rasgos fisonómicos
Sexo: puede presentar complicaciones en casos de hermafroditismo
Peso, talla y edad estimadas
Sistema piloso
Color de ojos y piel
Marcas particulares
Registro de la voz
Trazado caligráfico
Técnicas Bioquímicas empleadas en la identificación humana
Grupos sanguíneos
Enzimas eritrocitarias
Proteínas plasmáticas
Antígenos de histocompatibilidad (HLA
NOMBRE: JULIO CESAR COLQUE GUACHALLA
GRUPO: 5
