TÉCNICAS DE ESTUDIO DE LA CELULA
Células
Pequeñas
Transparentes
Ojo humano
0,1 mm
100 micrómetros(mm)
Microscopio óptico
Limite de resolución
0,2mm
Microscopio Electrónico
0,4
200 nanómetros(nm)
Alto contenido de agua
técnicas
Microscopia
Interferencia
DIFRACCIÓN DE RAYOS X
Ácidos Nucleicos
Prebióticos como los virus
Estudia la configuración molecular de proteínas
La luz visible pasa a través de la muestra y de los lentes de vidrio
Aumento del tamaño
1000
1500
Haz de electrones(2)
Microscopios electrónicos modernos
Resoluciòn
0,2 nm
100 veces mejor que el microscopio òptico
Tipos
Microscopio electrónico de transmisión
MET
Microscopio electrónico de barrido
MEB
Permite develar
Ultraestructura de las células
Matriz extracelular
Muestra de grosor
100nm
Estudios de superficie de espécimen
HAZ DE ELECTRONES
Se Recubre con una película de oro
exita a electrones sobre superficie
electrones secundarios se recolectan
Topografía del espécimen
ME
Revela organelas
MO
Imposible de resolver
Ventaja
estudio de la célula viva
desventaja
Métodos químicos y físicos
Matan a las células
Introducen artefactos
MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
Haz luminoso
Se proyecta oblicuamente
Detecta
Luz reflejada a Objeto brillante
Fondo oscuro
MICROSCOPIO DE LUZ POLARIZADA
Promueve datos
Nivel molecular
Tejidos
Preparados de
Post-mortem
FRACCIONAMIENTO CELULAR
Disgregar células separando organelas
Instrumento
Centrifuga
Ultracentrífuga
Vueltas
RPM (revoluciones por minuto)
80000
Fuerza sobre partículas
500000
Fuerza de la gravedad
500000g
Objectivo
romper las células sin dañar
HOMOGENATO
Se centrifuga
separa la célula en dos fracciones
PELLET
Estructura mas grande depositas en el tubo
SOBRENADANTE
Constituido por partes mas pequeñas
transvasado a otro tubo y centrifugado otra vez
CITÓMETRO DE FLUJO
Instrumento
tubo delgado
Pasan células
emite fluorocromo
permite
discriminación
separación de células
CULTIVO CELULAR
Cultivos Primarios
obtiene de
Animales
Vegetales
procedimiento
Se separa el tejido
se cortan en trozos
se trata con Tripsina
Cultivo Secundario
Obtiene de
Tratamiento de Tripsina
cultivo primario
Cultivo
Caja de Petri
Cultivos de Líneas establecidas
Estudio del cancer
Células
HeLa