Analisis protein dengan elektroforesis

Metode dasar

Prosedur

Metode Pengendapan Trizol BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY - Google Chrome 30_05_2021 20_55_30 (2)

Metode Pengendapan TCA Aseton BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY - Google Chrome 30_05_2021 20_49_28 (3)

Metode Tris Aseton Fenol BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY - Google Chrome 30_05_2021 20_49_28 (2)

Salting Out

Ekstraksi Protein

:

vidio tutorial proses ekstrasi protein

[()]

Pengertian

Isolasi protein adalah suatu tahapan dalam penelitian molekuler untuk mengetahui fungsi protein sebagai hasil ekspresi proses sintesis DNA.

Tujuan

untuk mendapatkan protein dengan tingkat kemurnian yang tinggi sehingga dapat dilakukan analisa lebih lanjut, seperti mengetahui karakteristik khas protein tersebut, termasuk ukuran, bentuk, muatan, hingga fungsi.

Sifat dan Struktur

gugus hidrofobik yang tertilap pada struktur lipatan protein (folded). Hal ini mengakibatkan sisi protein mudah untuk menerima dan melepaskan hidrogen membentuk ikatan hidrogen.

sisi hidrofilik atau sisi polar terbuka di sisi terluar struktur. bagian struktur folded ikatan hidrogen bersifat kokoh.

tahapan isolasi protein

penghancuran sel atau lisis sel

penggumpalan (koagulasi)

click to edit

proses penghancuran sel pada setiap sampel

Pada sel hewan, proses lisis sel dapat dilakukan dengan mudah karena sel hanya memiliki plasma membran dari fosfolipid dan protein.

sel tanaman, fungi, dan beberapa bakteri yang memiliki dinding sel. Tumbuhan juga memiliki jenis dan tipe protein yang sangat bervariasi yang mengakibatkan protokol purifikasi menjadi lebih sulit dan perlu perlakuan spesifik.

vidio simulasi cara ekstrasi protein

[()]

tutorial membuat grafik regresi dan nilai korelasi dengan Ms.Excel

[()]

Metode Kuantifikasi Untuk Uji Protein

BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY - Google Chrome 31_05_2021 04_39_21 (2)

Langkah pertama isolasi protein dengan tujuan memisahkan komponen protein dari bahan utamanya dan dengan menggunakan metode lisis. Metode lisis digunakan agar sel bisa menghasilkan protein intraseluler yang dapat terlarut didalam larutan yang sudah mengandung buffer. Ekstraksi protein dilakukan secara mekanik dan kimiawi

Elektroforesis SDS-PAGE

Proses pemurnian protein yang menggunakan garam (Ammonium sulfat) karena mempunyai pH yang bisa digunakan di semua protein, tingkat kelarutan yang tinggi, murah, dan efektif dibanding garam lainnya. Proses ini dilakukan dengan metode fraksinasi

Protein akan dipisahkan sesuai dengan berat molekul dan afinitas tertentu menggunakan medan listrik, atau bisa juga dengan gel elektroforesis yaitu berupa gel polikrilamida yang bertujuan untuk memisahkan protein dengan koloid dengan menggunakan SDS.