Analisis protein dengan elektroforesis
Metode dasar
Prosedur
Metode Pengendapan Trizol 
Metode Pengendapan TCA Aseton
Metode Tris Aseton Fenol
Salting Out
Ekstraksi Protein
:
vidio tutorial proses ekstrasi protein
[()]
Pengertian
Isolasi protein adalah suatu tahapan dalam penelitian molekuler untuk mengetahui fungsi protein sebagai hasil ekspresi proses sintesis DNA.
Tujuan
untuk mendapatkan protein dengan tingkat kemurnian yang tinggi sehingga dapat dilakukan analisa lebih lanjut, seperti mengetahui karakteristik khas protein tersebut, termasuk ukuran, bentuk, muatan, hingga fungsi.
Sifat dan Struktur
gugus hidrofobik yang tertilap pada struktur lipatan protein (folded). Hal ini mengakibatkan sisi protein mudah untuk menerima dan melepaskan hidrogen membentuk ikatan hidrogen.
sisi hidrofilik atau sisi polar terbuka di sisi terluar struktur. bagian struktur folded ikatan hidrogen bersifat kokoh.
tahapan isolasi protein
penghancuran sel atau lisis sel
penggumpalan (koagulasi)
click to edit
proses penghancuran sel pada setiap sampel
Pada sel hewan, proses lisis sel dapat dilakukan dengan mudah karena sel hanya memiliki plasma membran dari fosfolipid dan protein.
sel tanaman, fungi, dan beberapa bakteri yang memiliki dinding sel. Tumbuhan juga memiliki jenis dan tipe protein yang sangat bervariasi yang mengakibatkan protokol purifikasi menjadi lebih sulit dan perlu perlakuan spesifik.
vidio simulasi cara ekstrasi protein
[()]
tutorial membuat grafik regresi dan nilai korelasi dengan Ms.Excel
[()]
Metode Kuantifikasi Untuk Uji Protein
Langkah pertama isolasi protein dengan tujuan memisahkan komponen protein dari bahan utamanya dan dengan menggunakan metode lisis. Metode lisis digunakan agar sel bisa menghasilkan protein intraseluler yang dapat terlarut didalam larutan yang sudah mengandung buffer. Ekstraksi protein dilakukan secara mekanik dan kimiawi
Elektroforesis SDS-PAGE
Proses pemurnian protein yang menggunakan garam (Ammonium sulfat) karena mempunyai pH yang bisa digunakan di semua protein, tingkat kelarutan yang tinggi, murah, dan efektif dibanding garam lainnya. Proses ini dilakukan dengan metode fraksinasi
Protein akan dipisahkan sesuai dengan berat molekul dan afinitas tertentu menggunakan medan listrik, atau bisa juga dengan gel elektroforesis yaitu berupa gel polikrilamida yang bertujuan untuk memisahkan protein dengan koloid dengan menggunakan SDS.