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Antibiograma por el método Kirby-Bauer
PASO 1 Preparación del inoculo
-Inicia con un cultivo bacteriano puro previamente caracterizado, con un asa bacteriana se toma una colonia aislada y se inocule en un tuvo con solución salina estéril.
-Es inexpresable usar el mechero para flamear el asa y la boca del tuvo del ensayo, agite ruborosamente el inoculo hasta obtener una solución homogénea de aproximadamente 1.5X10^8 CFU/ ml esto se logra por el estándar de turbidez Macfarlan de 0,5.
-Si la turbales esta esta por debajo del estándar de debe tomar una o mas colonias del cultivo hasta igualar la turbidez.
-Si la turbidez es mayor se recomienda nuevamente iniciar con el inoculo.
PASO 2. SIEMBRA DE INOCULO EN EL MEDIO DE CULTIVO MUMUELLER-HINTON
-Se debe identificar debidamente la caja que contiene el medio de cultivo Mumueller-hinton.
-Se introduce un hisopo de algodón estéril al tuvo con el inoculo estandarizado en el paso anterior.
-El exceso de liquido se eliminara haciendo rotar suavemente el hisopo contra las paredes del tubo.
-Con el hisopado debidamente humedecido se inoculara tres o cuatro direcciones toda la superficie de la placa con el Mumueller-hinton girando suavemente dicha placa en ángulos de 90 grados.
-Descartar el hisopo en solución de hipoclorito.
PASO 3. APLICACION DE LOS SENSIDISCOS
-Con una pinza estéril, tome con precaución los sensidiscos previamente seleccionados.
-Según criterios microbiológicos y criterios médicos veterinarios.
-Los sensidiscos contienen los antibióticos a evaluar ubicándolos simétricamente en la superficie de Mumueller-hinton.
-Para algunos microorganismos se puede usar agar sangre.
-También puede ser usado el dispensador de sensidiscos lo cual facilita el trabajo ya que permite ubicar simétricamente en el agar varios sensidiscos al mismo tiempo.
-Ubique el dispensados sobre el agar y dispense los sensidiscos aplicando presión cuidadosamente sobre el dispositivo.
-Retirar el dispensador y verificar la disposición de los sensidiscos.
-Llevar los medios a la innovadora durante 12 o 24 horas a 37 grados.
PASO 4. LECTURA E INTERPRETACION
-Luego de la incubación retirar para la lectura.
-La lectura se hace mediante la observación de la presencia del Halo de inhibición alrededor de los sensidiscos.
-Este Halo de inhibición significa que no hay crecimiento de microorganismos ya que el microrganismo es sensible al respectivo antibiótico.
-Es necesario verificar la sensibilidad o resistencia del microorganismo frente al antibiótico esto se hace midiendo el diámetro del Halo de inhibición resultado que debe ser consultado en las bases de datos y la literatura.
-Y de esta manera poder recomendar un antibiótico para el tratamiento.
-El medico es responsable del tratamiento y deberá tener todas las precauciones y recomendaciones para el uso racional de antibióticos.
UNIV.: DANNY VIVIAN VARGAS CONDORI
GRUPO: 5
