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ANTIBIOGRAMA POR EL METODO KIRBY- BAUER
El aislamiento e identificación de un agente infeccioso a partir de una muestra clínica proveniente de un paciente no es suficiente para impartir una terapia
Actualmente numerosos microorganismos han desarrollado multiples mecanismos que les permite resistir a la accion de los mas nuevos y potentes agentes antimicrobianos.
El método kyrby bauer o de difusión en disco, es el método cualitativo mas utilizado para determinar la sensibilidad de un agente bacteriano frente a un antibiótico
PASOS PARA EL MONTAJE DEL METODO KIRBY BAUER
PASO 1 PREPARACIÓN DEL INÓCULO
EL método inicia con un cultivo bacteriano puro y caracterizado. Con un asa bacteriana se toma una colonia aislada, se inocula en un tubo con solución salina estéril. Es indispensable el uso del mechero para flamear el asa y la boca del tubo de ensayo. Agitar el inoculo hasta obtener una solución homogénea de aprox. 1.5 x 10´ 8 CFU / mL. Eso se logra con el estándar de turbidez Macfarlan de o.5. Simplemente se compara el grado de turbidez del inoculo con con el estándar
Si la turbidez esta debajo del estándar se debe tomar una o mas colonias del cultivo hasta igualar la turbidez.
Si la turbidez esta por encima o es mayor del estándar se recomienda iniciar nuevamente con el inoculo.
PASO 2 Siembra de inóculo en el medio de cultivo MuMuller-Hinton
Se debe identificar debidamente la caja que contiene el medio de cultivo mimuller hinton, luego se introduce un hisopo de algodón estéril al tubo, con el inoculo estandarizado. El exeso de líquido se eliminara haciendo rotar suavemente el hisopo contra las paredes del tubo y ya con el hisopo humedecido se inoculara en 3 o 4 direcciones toda la superficie de la placa con el hagar mumuller hinton girando suavemente en dicha placa en algulos de 90°.(descarteliza con solucion de hipoclorito)
PASO 3 APLICACIÓN DE LOS SENSIDISCOS
Con una pinza estéril tome con precaución los sensidiscos previamente seleccionados. Según criterios microbiológicos y criterios médicos veterinarios los sensidiscos contienen los antibioticos a evaluar, debemos ubicarlos en la superf. del agar Mumuller hinton, Para algunos microorganismos se puede usar hagar sangre.
Tambien se puede usar el dispensador de sensidiscos lo cual facilita el trabajo ya que permite ubicar simetricamente en el hagar varios sensidiscos al mismo tiempo. Para esto debemos ubicar el dispensador sobre el hagar y dispencelos en los sensidiscos aplicando presion y cuidadosamente sobre el dispositivo, luego se retira el dispensador.
Llevar a la incuvadora durante 12 a 24 horas a 37°
PASO 4 LECTURA E INTERPRETACIÓN
Luego de la incubación retire los medios para la lectura la cual se hace mediante la observación de la presencia de halo de inhibición alrededor de los sensidiscos, este halo de inhibición significa que que no hay crecimiento de microorganismos ya que el microorganismo es sensible al respectivo antibiótico.
Sin embargo es necesario verificar la sensibilidad o resistencia del microorganismo frente al antibiótico y eso se hace midiendo el diámetro del halo de inhibición, resultado que debe ser consultado en las bases de datos y la literatura y de esta manera poder recomendar un antibiótico para el tratamiento.
UNIV. JHOSELIN JUDITH MAMANI ARAPA GRUPO 5
