Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
ANTYBIOTYKI, PCR, BADANIA MIKROBIOLOGICZNE KOSMETYKÓW, BADANIA, LEKI…
ANTYBIOTYKI
wrażlwiość na antybiotyki
cecha drobnosytroju, która pozwala mu na podwyższenie jego stężenia hamującego do poziomu niemożliwego do uzysaknia in vitro.
odporność naturalna
nabyta, wynika z budowy, moze być związana z brakiem receptorów dla danego leku, nieprzepuszczalnością błony komórkowej albo produkowanie specyficznych enzymów
odporność nabyta
pojawia się wksutek samoistnych zmian w komórce drobnoustroju lub otrzymania gotowego mechanizmu od innego drobnoustroju
substancje wuytwarzane przez bakterie promieniotwórcze i grzyby
maja zdolność do hamowania procesow życiowych drobnoustrojow chorobotworczych
działanie bakteriostatyczne i fungistyczne
PCR
skladniki mieszaniny:
matrycowy dna
mieszanka nukleotydow
startery
termpostabilna polimeraza dna
denaturacja
rozplecienie podwojneh helisy dna, w syokiej temperaturze rozerwaniu ulega wiazania wodorowe i podowjna helisa rozdziela sie na dwa pojedyncze lancuchy
przylaczeni starterów
tworzenie dwuniciowych odcinkow skaldajacych sie w przygotowwanych starterów i amtrycowego dna
elongacja / wydluzenie lancucha
wlasniwa synetza dna i tym samym aplifikacja pozadanego genomu
Metoda powielania lancuchow dna polegajaca na lancuchowej reacji polimerazy dna w wyniku wielokrotnego podrzewania i oziebiania probki
BADANIA MIKROBIOLOGICZNE KOSMETYKÓW
CEL: monitoring zanieczyszczeń podczas całego procxesu produkcji kosmetyku, od pozyskiwania surowców i higieny pracy po gotowy produkt
badanie te weryfikuje stopień czystości mikrobiologicznej kosmetyków i tym samym potwierdzając ich bezpieczeństwo
badanie czystości mikrobiologicznewj jest kluczowym elementem bezpieczeństwa produktu
ogólna liczba drobnoustrojów ( w normie EN ISO) - wyznacza granicę liczbt drobnoustrojów w pordukcie
obecność drobnoustrojów ( w normie EN ISO) - oznacza że drobnoustrojów nie może być w produkcie
BADANIA
antybiogram
wynik badania wrażlwiosci bakterii na substancje przecibakteryjne w warunkach in vitro
w praktyce : badanie wrażlwiosci i opornosci bakterii na antybiotyki i chemiterapeutyki przecidrobnoustrojowe.
badane izolaty poddaje się ocenie wrażliwości na poszczególne rodzaje antybiotyków metodą dyfuzyjno-krążkową.
wyznaczanie minimalnego stezenia hamujacego mic
metodą seryjnych rozcieńczeń w podłożu płynnym
przygotowaniu serii probówek z płynnym podłożem wzrostowym dla bakterii i grzybów.
dodaje antybiotyku lub chemiterapeutyku w odpowiednich, maljeących stężeniach
dodanie do próbki takiej samej ilości zawiesiny drobnoustroju
inkubacja
zmętnienie próbki = steżenie leki mniejsze niż MIC (wzrost drobnoustrojów)
MIC - najnizsze stężenie antybiotyku w którym nie obserwuje się wzrostu żadnego mikroorganizmu (brak zmętnienia próbki)
e test
gradientowo-dyfuzjna metoda ustajaąca najniższe stężenie antybiotyku hamującego rozwój drobnoustrojów
ustalenie dokładnego stopnia odpornosci na lek
nałożenie wąskiego prążka nasączonego antybiotykiem o odpowiednim stężeniu na podłoże stał wysiane drobnoustrojami
inkubacja
mic wynosi tyle ile stężenie antybiotyku, przy którym nie obserwujesię wzrostu ani jednej kolonii drobnoiustrojów
mykogram
badanie mikorbiologiczne, które ma na celu oznaczenie wrażliwości na leki przecigrzybicze grzybów chorobotówrczych wyhodowanych z materiału pobranego od pacjenta
oznaczanie wrażliwości na leki
LEKI CHEMIOTERAPEUTYCZNE
Związki chemiczne, które wporwadzone do organizmu zakażonego nie są dla niego toksyczne ale powodują zniszczenie drobnoustrojów chorobotwórczych
uszkadzają ściany lub/i błony komórkowe i zaburzają ich czynności
hamują syntezę białek strukturalnych i enzymatycznych cytozolu
uszkadzjaą mteriał genetyczny drobnoustroju
PROJEKTOWANIE STARTEROW
startery - krotkie oligonukletoydowe sekwencje ktore wiaza sie z sekwencja genomowa w warunkach reakcji pcr
dobrze zaprojektowane startery pozwalaja na indentyfikacje mutacji genetycznych czy fragmentow genomowych
matrycą / sekwencja/ moze byc kazdy dowolny organizm, ktorego sekwencja jest znana i opisana w bazach danych
cechy starterow:
specyficznosc - starter nie moze sie laczyc nigdzie indziej w genomie poza docelowa sekwencja
odpowiednia temperatura topnienia
brak powinowactwa wzgledem siebie i tworzenia tzw., primer-dimer
nie powinny zawierac popularnych wariantow genetycznych
GRONKOWIEC ZŁOCISTY - STAPHYLOCOCCUS AUREUS
powoduje ropnie skóry, czyraki, czyrak mnogi, zespół oparzonej skóry
w populacji 30-60%
nie może on być obecny w kosmetykach
szybko namnaża się w kosmetykach
PAŁECZKA ROPY BŁĘKITNEJ - PSEUDOMONAS AERUGINOSA
u osób w obniżoną odpornością, przy zarażonej skórze
często występują w kosmetykach, w preparatach szpitalnych
bardzo doporna na antybiotyki
wydziela bardzo dużo enzymów
BELNIK BIAŁY - CANDIDA ALBICANS
u kobiet powoduje drożdżaka pochwy
afrty, zajady, drożdżyca przewodu pokarmowego
antagonistą jest kwas mlekowy
w przypadku dostania się do kosmetyków powoduje drożdżycę skóry
TEST KONSERWACJI - CHALLENGE TEST
Gwarancja, że zastosowane środki konserwujące zabezpieczają produktu kosmetyczny przed rozwojem niebezpiecznych drobnoustrojów i chronią przed rozwojem wtórnym zakażeń w trakcie użytkowania.
polegają na zakażeniu badanej masy kosmetycznej szczepami Pseudomonas aureginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans, Aspergillus brasiliensis i obserwacji redukcji drobnoustrojów
dobry konserwant - cechy:
brak smaku, zapachu, barwy
nie wchodzi w reakcje z innymi składnikami kosmetyków
odporne na promieniowanie UV
skuteczne przez długi czas
na jakich etapach przeprowadza się test konserwacji?
etap opracowania produktu
w czasie produkcji
dla zabezpieczenia produktu kosmetycznego w przypadku nieprzewidzianego wystąpienia zakażenia w czasie produkcji i podczas użytkowania przez konsumenta
dla oceny działania wobec szczepów środowiskowych
METODA FARMAKOPEALNA - PRODUKTY LECZNICZE I TESTY KO KO
Wprowadzenie do zakonserwowanej próbki produktu referencyjnych szczepów
metoda farmakopealna - kosmetyki lecznicze wykonane według Farmakopei Polskiej
Ko Ko Test - brane pod uwagę są wszystkie szczepy mikroorganizmów, w celu sprawdzenia czy mikroorganizm może być zatrzymany przez konserwant
metoda PN ISO - do próbki wprowadzane są drobnoustroje (0,2ml zawiesiny na 20gram produktu)
badanie wykonuje się oddzielnie dla każdego szczepu
METODY POBORU PROB DO ANALIZY AEROZOLU BIOLOGICZNEGO
SEDYMENTACJA WG KOCHA
otwarte płytki z podłożem stałym należy zostawić na 30 minut 1 m od podlogi
METODA ZDERZENIOWA
aeroskopy, impkatory
wymoszony przepływ powietrza przez sczelinę okrywy, sprawia że uderzając o powioerzchnie podłoża stałego mikroorganzimy przyklejają się
inkubacja szalek petriego 24-45 h w 37 stopniach (bakterie), 5-7 dnmi 20-25 stopni (grzyby)
zliczanie kolonii
ocenia ilościowa
ozliacja czystych kultur mikroorganizmow
przygotowywanie preparatow mikroskopowych barwionych metoda gramma
ocena mikroskopowa
METODA FILTACYJNA
przepuszczenie próbki powietrza przez filtr, na którym zatrzymują się zanieczyszczenie mikrobiologiczne.
po przenieiseiniu na powierzchnię pożywnego agaru, poddaje się inkubacji i zliczaniu liczby kolonii.
PAŁECZKA OKRĘŻNICY - ESCHERICHIA COLI
Wywołuje biegunkę, wymioty, infekcje układu moczowo-płciowego
nie może występować w kosmetykach - obecność ich świadczy o zanieczyszczeniu kałowym
POTWIERDZENIE AKTYWNOŚCI PRZECIWDROBNOUSTROJOWEJ
w celu potwierdzenia lub wykluczenia właściwości przeciwdrobnoustrojowych produktu wobec wybranych szczepów testowych
metody:
zawiesinowa
określa stopień redukcji drobnoustrojów
krążkowa
wyznaczająca strefę zahamowania wzrostu drobnoustrojów
MASZYNY DO STERYLIZACJI
AUTOKLAW
podgrzewany pojemnik o wzmocnionej konstrukcji, który można hermetycznie zamknąć na czas prowadzenie procesu sterylizacji parą wodną pod podwyższonym ciśnieniem.
w gabinetach usługowych, szpitalach, laboratoriach badawczych, analitycznych i chemicznych
oczyszczenie narzędzi, dezynfekcja w wanience, płukanie, suszenie, kontrola jakości, konserwacja, pakowanie narzędzi, sterylizacja, ułożenie narzędzi
lampy bakteriobójcze
BIOAEROZOLE W ZAGROŻENIU ZAWODOWYM
badając bioaerozol należy wykryć dany czynnik i okreslić stopień narażenia w środowisku pracy
RODZAJE POSIEWÓW MIKROBIOLOGICZNYCH
pojedyncze kolonie komórek można uzyskać dzięki:
posiewowi powierzchniowemu:
na podłoże stałe w płytce Petriego, który wykonuje się za pomocą ezy lub pipety
na płytki Petriego z zestalonym podłożem nanosi się po 0,1cm3 wybranych, kolejnych rozcieńczeń próby w dwóch powtórzeniach
materiał rozprowadza się jałową głaszczką na powierzchni całego podłoża, aż do wyschnięcia
posiewowi wgłębnemu
zawiesinę mikroorganizmów wprowadza się na dno pustej szalki Petriego, później zalewa się upłynnionym i schłodzonym podłożem stałym
nanosi się 1 cm3 wybranych kolejnych rozcieńczeń w dwóch powtórzeniach, następnie wylewa się określone podłoże ogrzane w 42-44 stopniach