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METODOS DE ESTUDIO DE BACTERIAS Y VIRUS - Coggle Diagram
METODOS DE ESTUDIO DE BACTERIAS Y VIRUS
ESTRATEGIA EN LA ELECCIÓN DE LOS MÉTODOS
Para determinar la eficacia del método a elegir se toma parámetros como: sensibilidad, especificidad y valores predictivos positivo y negativo.
El laboratorio de microbiología deberá tener a disposición del clínico todas las pruebas necesarios para el diagnóstico y la atención de los pacientes a servir.
INTRODUCCIÓN
Se da los diferentos procedimientos o metodos para un buen diagnostico y tratamiento:recolección,
rotulado y transporte de las muestras; evaluación de las muestras y pruebas de laboratorio
Existen muchos métodos para el diagnostico de infecciones microbianas: examen directo, aislamiento por cultivo, detección de antígenos y ácidos nucleicos y pruebas serologicas para detectar la respuesta de anticuerpos del individuo a la infección.
Un propósito de la microbiologia medica es de trabajar con la clínica para el diagnostico y manejo de enfermedades infecciosas. Identificando las causas y el tratamiento para un buen manejo.
No hay ningún método que nos de un diagnostico preciso en si, para lo cual se debe emplear la unión de métodos, tomando en cuenta la eficacia y y el conocimiento del agente patógeno.
RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS
-Los hemocultivos se reciben como muestras únicas o más de tres en 24 horas. -Para los virus, las mejores muestras generalmente son las que se obtienen al inicio de la enfermedad (dentro de las primeras 72 horas).
Para la recolección de las muestras , se debe considerar las medidas y el como realizarlo; es importante que el personal que vaya a realizar el procedimiento sepa y entienda lo que debe hacer.
La utilidad de un procedimiento analítico esta directamente influido por la calidad de la muestra. Es decir que la muestra debe ser representativa de la enfermedad.
Es importante que las muestras que se vaya a recibir en el laboratorio cumplan con el tiempo desde que se tomo la muestra hasta el momento de llegar al laboratorio.
Ejemplo de recolección y transporte de muestras clínicas.
Aspirado nasofaríngeo
Hisopados nasales
Hisopados de lesiones y vesículas cutáneas
Hisopados faríngeos
Hisopados conjuntivales
Líquido cefalorraquídeo (LCR)
MÉTODOS
MÉTODOS INDIRECTOS
Son aquellos que reconocen la respuesta inmune (humoral o celular) que desarrolla el huésped. Se basan en la detección de anticuerpos específicos mediante técnicas inmunológicas
(EIA, IF, western blot, etc.).
MÉTODOS ALTERNATIVOS
Otros métodos que pueden usarse en forma alternativa a los cultivos, tienen algunas ventajas y desventajas respecto a éstos. La especificidad puede ser imperfecta. Además, pueden ser incapaces de estudiar el patógeno en cuestión, como lo permite el aislamiento del microorganismo.
MÉTODOS DIRECTOS
Son aquellos que detectan: al microorganismo por microscopia, al microorganismo por cultivo, a los antígenos del microbio y los ácidos nucleicos (reacción en cadena de la polimerasa). Para la detección de antígenos se usan técnicas inmunológicas como la inmunofluorescencia (IF), el enzimoinmunoanálisis (EIA) y los test de aglutinación.
DIAGNÓSTICO MICROSCÓPICO DE LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS
Puede ser necesario el examen microscópico del tejido para distinguir la enfermedad invasiva de la colonización superficial, una distinción que no se logra fácilmente mediante métodos de cultivo.
La mayoría de las muestras se tratan con una tinción de Gram, y si se sospecha la presencia de micobacterias, con una acidorresistente (tinción de Ziehl-Neelsen).
Como la detección microscópica en general requiere una concentración de microorganismos de al menos aproximadamente 1 × 104-5/mL, la mayoría de las muestras de líquidos (como líquido cefalorraquídeo) deben concentrarse antes de ser observadas.
AISLAMIENTO Y CULTIVO DE MICROORGANISMOS VIABLES
La elección de métodos y medios de cultivo se ajusta a la naturaleza, al origen de la muestra y a los interrogantes que se pretende responder
En el laboratorio de bacteriología clínica cuando se realizan estos cultivos, hay que considerar su sensibilidad para las diferentes muestras.
Es imperativo en estas situaciones tener más de una muestra para poder interpretar estos resultados y definir si es una contaminación accidental o el microorganismo aislado es el responsable de la enfermedad.
CULTIVOS CELULARES
Los cultivos celulares pueden ser obtenidos a partir de explantes de biopsias, por perfusion de un órgano especifico, por disgregación de tejidos o a partir de fluidos orgánicos como la sangre.
Es un modelo de estudio in-vitro constituido por células que pueden crecer y mantenerse en suspencion o en mono-capa por mas de 24 horas en condiciones controladas.
INMUNOQUIMICOS
Es importante destacar que generalmente, todas las pruebas mejoran la especificidad y sensibilidad con los Ac monoclonales, pero su uso debe ser valorado junto a las necesidades, los costos, etc.
Aunque existen técnicas diferentes para la detección de Ag o de Ac, todas se basan en diferentes formas de evidenciar una reacción Ag-Ac. La contrainmunoelectroforesis (CIE) fue una de las primeras técnicas en usarse.
Estos ensayos se basan en la detección de anticuerpos (Ac) específicos que permiten señalar a determinado microorganismo presente en una infección. La otra posibilidad es la detección de antígenos (Ag) solubles en los materiales a estudiar. Son todas reacciones de tipo antígeno anticuerpo (Ag-Ac).