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- - - - Centrifugar a 4 ºC durante 20 minutos, aspirar el sobrenadante y mantenerlo
        en hielo
  - - - Se aplica un campo eléctrico que provoca el movimiento de las proteínas, las cuales se separan en función de su talla, o
        peso molecular
- - - - Depende de la incubación de la prueba con un sustrato que reacciona gracias a la enzima reporter peroxidasa, unida al anticuerpo secundario. La cuantificación proteica se evalúa por densitometría o por espectrometria.
    - - La detección por quimioluminiscencia requiere la incubación de la membrana con un sustrato, que emite luz al ser expuesto a la peroxidasa. Se analiza la imagen por densitometría para evaluar la cantidad relativa de mancha y cuantifica el resultado en términos de densidad óptica.
    - - Los marcadores radiactivos no requieren sustratos enzimáticos; entonces lo que se hace es poner una película fotográfica contra el Western blot y la actividad radiactiva del marcador provoca la aparición en ella de regiones oscuras.
    - - En la detección con marcadores fluorescentes hay excitación lumínica. Es detectable por un foto sensor y la fluorescencia es considerada uno de los métodos de análisis más sensibles para la técnica de Western Blot.