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Técnicas para la transferencia de genes a bacterias, Integrantes,…
Técnicas para la transferencia de genes a bacterias
La transferencia de genes a bacterias mediante el uso de plásmidos supone el uso de endonucleasas de restricción y de la ADN ligasa.
Los plásmidos
Son pequeños fragmentos circulares de ADN adicional.
Los más pequeños tienen unos 1.000 pares de bases (1 kbp), pero pueden tener más de 1.000 kbp.
Normalmente se encuentran en las bacterias.
Los más abundantes son aquellos con genes que estimulan su replicación en el citoplasma y se transfieren de una bacteria a otra.
Las bacterias los absorben naturalmente e incorporan a su molécula principal de ADN circular.
Los plásmidos son muy útiles para la ingeniería genética.
Las enzimas de restricción
Se caracterizan por seleccionar las moléculas de ADN de secuencias de bases específicas. Algunas tienen la propiedad de cortar las dos cadenas de una molécula de ADN
Los extremos cohesivos que se generan a partir de una enzima de restricción particular tienen secuencias de bases complementarias que pueden utilizarse para unir trozos de ADN entre sí, mediante puentes de hidrógeno entre las bases
ADN Ligasa
Su función principal es unir firmemente las moléculas de ADN mediante puentes de azúcar-fosfato entre los nucleótidos.
Cuando se inserta un gen determinado en un plásmido utilizando los extremos cohesivos, quedan pequeños huecos en cada columna de azúcar-fosfato del ADN que pueden sellarse utilizando la ADN ligasa.
Es una enzima de tipo ligasa.
Producción de insulina recombinante
Paso 1: Las enzimas de restricción cortan el gen de la Insulina del Genoma Humano
Paso 2: La E.coli posee anillos circulares de Plásmido. La enzima de restricción "corta" esta vez el Plásmido.
Paso 3: La enzima ligasa une los extremos complementarios, fijando el gen en el plásmido de E.coli
Paso 4: A las células hospedadoras se les insertan el plásmido recombinante, expresando el nuevo gen. De esta forma es que se produce insulina humana industrialmente.
Un requisito para que ocurra es tener una copia del gen que se va a transferir
Generalmente es más fácil obtener transcripciones del ARN mensajero de los genes que los mismos genes.
La transcriptasa inversa es una enzima que permite hacer copias de ADN a partir de moléculas de ARN llamadas ADNc.
Estas moléculas pueden utilizarse para crear el ADN necesario para la transferencia de genes a partir del ARN mensajero.
Integrantes
Nieves Cadenas
Naira Ruiz
Valeria Vidal
Alejandro Pinto
Renato Gardella
César Guillén
Referencias
Affibody. (s.f.). Insulin capture from human serum (Captura de insulina de suero humano). Consultado en
http://affibody.com/upload/Research%20Reagents/Application%20notes/Insulin%20AFF%20application%20note%202007-03-30.pdf
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Amgen Biotech Experience. (2015). Guía para el estudiante. Consultado en
https://www.amgenbiotechexperience.com/sites/abe.edc.org/files/abe_english_student_all_sequences_05
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