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Métodos Analíticos de Microbiologia de Alimentos: Teste Confirmativo -…
Métodos Analíticos de Microbiologia de Alimentos: Teste Confirmativo
Após 48hrs do Teste Presuntivo;
Contagem dos tubos: tanto positivos quanto negativos para coliforme;
Resultado positivo: visualização de aparência turva (flagelos) no líquido e bolha de gás (fermentação da lactose pelo grupo coliforme - principal indicação);
Como ter certeza do resultado positivo: inverter o tubo de Durhan (colocá-lo de ponta cabeça), dar leves batidinhas e observar se há a liberação de bolhas.
Diluição 1:10 com resultado positivo para colifome;
Diluição 1:100 com resultado negativo para coliforme;
Diluição 1:1000 com resultado negativo para coliforme.
Teste confirmativo: 4 gêneros do grupo coliforme.
Teste confirmativo para E. coli.
Organizar os resultados em tabela.
Teste confirmativo para o grupo total
Técnica Número Mais Provável (NMP).
Pegar 1mL do caldo com diluição 1:10 e passar para o tubo com caldo VBBL e homogeneizar;
Realizar o procedimento 3 vezes (3 tubos de diluição 1:10 e 3 tubos de caldo VBBL);
OBS: Caldo EC é um meio seletivo para contagem e diferenciação de coliformes em água, esgoto e alimentos
Pegar 1mL do caldo com diluição 1:10 e passar para o tubo com caldo EC e homogeneizar;
OBS: Caldo VBBL é um meio seletivo para detecção de coliformes e coliformes fecais em leite, produtos lacticínios e em outros alimentos
Trabalhar sempre em torno do fogo
Após homogeneizar os 6 fracos, colocar eles de ponta cabeça e dar leves batidinhas para retirar possíveis bolhas de ares que possam surgir durante o procedimento de adição e homogeneização;
Levar para a encubação: teste confirmativo total (caldo VBBL) - estufa bacteriológica a 35°C por 48hrs
Levar para a incubação: teste confirmativo coliforme termotolerantes (caldo EC) - 44,5ºC em equipamento banho maria por 24hrs
Após esse período, verificar se houve ou não bolhas de ar no tubo de Durhan e aplicar a tabela para o resultado final.
As 3 amostras do caldo VBBL deram positivo para coliformes totais;
Realizar o procedimento 3 vezes (3 tubos de diluição 1:10 e 3 tubos de caldo EC);
Cuidado com os cálculos, olhar sempre a gramatura da amostra;
As 3 amostras do caldo EC deram negativas para E. coli.
3 estágios de testes.