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PRÁCTICA No. 5: CUANTIFICACIÓN DE LINFOCITOS T MEDIANTE ROSETAS
Tomar de 3-5 mL de sangre, depositarlos en un tubo con tapón de baquelita,
colocar una perla de vidrio por cada mL. de sangre y desfibrinar.
Tomar 1.5 mL. de sangre desfibrinada y
agregarla a un tubo de ensaye que contenga 1.5 mL. de Lifoncell.
Centrifugar a 1 500 rpm durante 15 minutos para la separación de linfocitos.
Con una pipeta Pasteur, tomar los linfocitos (capa intermedia entre la sangre y
el Linfocell y transferirlos a un tubo 12x75 mm.
Realizar 2 lavados en los linfocitos recuperados, utilizando 2 mL de solución
salina fisiológica.
Centrifugar los linfocitos lavados a 2 500 rpm durante 5 minutos.
Observar el anillo que se forma al fondo del tubo, ya que estos son los linfocitos, al eliminar la solución salina debe quedar un volumen aproximado de ± 0.25 mL.
Agitar suavemente para re-suspender los linfocitos y con una pipeta Pasteur
colocar una gota en un portaobjetos para observar al microscopio y verificar la presencia de linfocitos.
Aparte preparar una solución de eritrocitos de carnero al 2 %. V/V en solución
salina fisiológica.
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(Esther Fernández et al 2013)
(María Antonia et al 2008)
(Sara Ryding, 2019)
(Francisco Rodríguez 2017)
(Eugenia Mata y Bruno Lomonte, et al 2015)
(Sara Ryding, 2019)
(Francisco Rodríguez 2017)
(Esther Fernández et al 2013)