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Tegnología de proteínas :<3:
Frederick Sanger
Secuencia de Insulina bovina(1953)
Dilucidado las estructuras de proteínas
EDMAN
Método de degradación
La secuencia de residuos de una proteína a partir de su secuencia de DNA o de mRNA.
Purificación
Precipitación de proteínas por medio de sales
Técnica para concentraciones elevadas de sales como sulfato de amonio
Diálisis
Eliminar impurezas de peso molecular bajo, los disolventes y los detergentes
Análisis de Proteínas
Electroforesis
Las proteínas se mueven en un campo eléctrico como consecuencia de carga eléctrica
Las moléculas se separan unas de otras debido a las diferencias de su carga neta
Carga positiva(ánodo). Carga negativa (cátodo)
Se utiliza geles como policramida o agarosa
Separa proteínas según peso molecular y su forma
Electroforesis en gel policramida
Determinar el peso molecular
Moléculas se unen al SDS de manera proporcional a sus pesos moleculares
Estas migran hacia el ánodo solo en reacción con su peso molecular
CROMATOGRAFÍA
Fase móvil
Fase Estacionaria
La cromatografía de filtración en geles.
La cromatografía de intercambio iónico
La cromatografía por afinidad
ANÁLISIS DE LAS SECUENCIAS DE LAS PROTEÍNAS.
El análisis de la secuencia de una proteína.
Composición de aminoácidos.
Se denomina hidrolizado.
Rotura de todos los enlaces disulfuro.
Determinación de los aminoácidos terminales N y ter-
minales C.
Escisión del polipéptido en fragmentos.
Determinación de las secuencias de los fragmentos
peptídicos.
Ordenamiento de los fragmentos peptídicos.
Cristalografía rayos x
Información tridimensional
Proteínas de la distancia de un enlace aproximadamente de 15 nm
En la cristalografía de rayos X se exponen especímenes cristalinos muy ordenados a un haz de rayos X
Los patrones de difracción se utilizan para construir un mapa de densidad electrónica.
Espectrometría de de masas
Análisis de secuencias de aminoácidos se hace uso de MS en tándem
Ionización y vaporización de sustancias
Un detector mide la deflexión de cada ion
Técnica poderosa y sensible para separar e identificar moléculas, determinar su masa
Campo magnético, fluyen moléculas ionizadas
Relaciones masa y carga
