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Measurement of Microbial Growth, image, image, 10941059A - Coggle Diagram
Measurement of Microbial Growth
間接測量
Metabolic activity(代謝作用)
微生物生長過程中有著物質的合成與分解,在其過程中也會有代謝產物,這些代謝出來的產物可以用來當作判斷生長的依據。
例如
有些微生物的代謝作用中,免不了有碳元素的生成,利用測定培養物的含碳量來判斷微生物的生長量
微生物細胞內的其他成分,如磷、DNA、RNA、ATP等的含量,以及產酸、產氣、產二氧化碳、耗氧、黏度和產熱等指標,也都可以用於生長量的測定。
Dry weight (乾重法)
採用離心法或過濾法測定,一般乾重為濕重的10%-20%,一個細菌一般重10-12~10-13g。
離心法
將待測培養液進行離心,再用清水洗滌離心1~5次後乾燥,可用105℃、100℃或紅外線烘乾,也可在較低的溫度(-80℃或-40℃)下進行真空乾燥,然後稱乾重。
過濾法
絲狀真菌可用濾紙過濾,如為細菌可用乙酸纖維膜等濾膜進行過濾。過濾後,細胞可用少量水洗滌,再真空乾燥(-40℃以下),稱乾重。
一般在液體培養基中,細菌的濃度的數量級大約為108CFU/mL, 100 mL培養物可獲得10 mg ~300 mg乾重的細菌。
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Turbidity(濁度)
測量通過懸浮質點介質的光强度來確定懸浮物濃度
可以用一些儀器來測量濁度,例如麥氏比濁儀
水的濁度可以用沈澱或是過濾等方式來降低。依應用的不同,會在水體中加入化學藥劑以加速靜置或過濾的過程。瓶裝水的處理及都市的廢水處理一般不會有程序專門降低濁度,會利用砂濾、沈澱池以及澄清池一連串的程序來降低濁度。
例如絮凝劑,而且會均勻的分布在水體上。最後絮凝物會沈降到水體的底部,當水由較淺處取出時,絮凝物仍在水體底部。此方法常用在煤礦業及製煤工廠,在雨季時雨水收集池的水相當渾濁。許多公司也提供原位水處理或是直接投藥處理的可攜式淨水系統。
正常之酸性環境的水質為澄清狀態,中性或鹼性環境水質經常出現混濁現象,來自於金屬離子與氫氧根或碳酸根所形成的懸浮固體以及水體中的微生物。
飲用水的濁度越高,飲用者出現消化道疾病的風險就越高,這對免疫功能低下的人而言格外的嚴重,因為像細菌或是病毒等致病原可能附著在懸浮物質的表面。在用氯進行水的消毒時,懸浮物質也會成為致病原的屏障,影響消毒的效果。
每個政府所定制的飲用水濁度標準不同,例如美國的飲用水標準是不得超過1NTU,而台灣的飲用水標準是不得超過2NTU(Nephelometric Turbidity Units)
10941310A 吳曉龍
直接測量
Filtration(過濾作用)
絲狀真菌
濾紙過濾
細菌
乙酸纖維膜等濾膜進行過濾
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The Most Probable Number(MPN) Method
以統計學推估最可能的細菌數
1.將待測樣品作一系列稀釋
2.稀釋到將少量的稀釋液接種到新鮮培養基中沒有或極少出現生長繁殖。
3.根據沒有生長的最低稀釋度與出現生長的最高稀釋度,採用“最大或然數”理論,計算出樣品單位體積中細菌數的近似值
缺點
準確度不高
Plate Counts(平板記數法)
一般是用來測定水、牛奶或食品中微生物的數目
先利用一連串的稀釋將樣品中的微生物做適當稀釋
再用稀釋塗抹法培養後測數數目
生菌數(CFU/公克 或 CFU/ml)
簡稱為SPC (standard plate count)
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平板計數法可以測出總好氧、兼氧異營性細菌密度
對自營菌、厭氧菌、光合細菌及特殊營養需求的細菌無法測得
優點:實驗器材簡單,操作容易,技術壁壘低,成本低
缺點:操作麻煩,太慢,易受環境雜菌污染干擾,只適用於微生物數量很小的樣品
直接計數法原理
適用範圍
各種含單細胞菌體的純培養懸浮液。
方法
在載片和蓋玻片中間添加細菌懸浮液,,並通過毛細作用填充正方形上方的淺層體積。
因蓋玻片下的深度和正方形的面積是已知的,因此可計算正方形上懸浮液的體積(深度*面積)
對數個大正方形中的所有細胞進行技術,並將其平均。
舉例
大方塊有14個細菌細胞。大方塊的流體大方塊有14個細菌細胞。大方塊的流體量為1/1250000毫升,如果他包含14細胞。大方塊的流體量為1/1250000毫升,如果他包含14個單元格,則每毫升中有14*1250000=17500000個單元格。
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