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Técnicas de Biología Celular y Molecular - Coggle Diagram
Técnicas de Biología Celular y Molecular
Analisis Morfológico
Microscopio
Tiene límite de resolución
Tinción hematoxilina eosina
Morado se tiñe el nucleo
Rosado el citoplasma
Inmunihistoquímica
Usa anticuerpos y enzimas para teñir
Si se tiñe la proteína se está expresando
Se pueden diferenciar células morfológicamente similares
Inmunofluorescencia
Usa anticuerpos y un fluorósforo
Permite demostrar la presencia de una proteína
Proteína fluorescente verde GFP
Microscopía Electrónica
Usa Electrones
Tiene mayor resolución
Se pueden ver organelos y membranas
De Barrido genera una imagen 3D
Análisis de Ácidos Nucleicos
Sobre expresión y silenciamiento de genes
Knock down: Disminuye el nivel de expresión.
Knock out: A través de mutación no se expresa el gen.
Expresión Génica
Se corta una parte del gen y se comprueba con PCR
Reacción de Polimerasa en Cadena, PCR
Es una amplificación de DNA, los partidores permiten que la amplificación sea específica.
Microarreglos
Se realiza con programas y microchips
Northern Blot
Detecta RNA, los separa por densidad
Southern Blot
Detecta DNA, no requiere anticuerpos
Wester Blot
Detecta Proteínas, se usan anticuerpos, se revela por electroforesis.
Electroforesis
Separa proteínas y ácidos nucleicos, se desnaturalizan la proteínas con SDS, detergente. Las proteínas más grandes quedan arriba, polo negativo, y las pequeñas abajo, polo positivo.
Análisis de Proteínas
ELISA
Determinación Cuantitativa de Proteínas
RT PCR, transcripción reversa
Convierte RNA en DNA
Sirve para saber si se está transcribiendo una proteína