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TECNOLOGIAS DE SECUENCIACIONGUAJA - Coggle Diagram
TECNOLOGIAS DE SECUENCIACION
Es un grupo de tecnologias diseñadas para analizar gran cantidad de DNA de forma masiva y paralela.
TIPOS DE SECUENCIACION.
Secuenciacion completa del exoma
Secuenciacion completa del genoma
Panel de genes
GENERACIONES DE SECUENCIACION
Tercera generacion
SECUENCIACION MEDIANTE NANOPOROS
Tecnica que consiste en la generacion de nanoporos que mide la frecuencia de las corritente electrica de iones que pasan por los nanoporos, que por medio de la magnitud indicara el nucleotido que pasa por las fecuencias.
Esta tecnica aun se encuentra en desarollo esperando llegar a las metas establecidas por los cientificos ya sea en cuanto a precio, cantidad y velocidad.
Informacion y analisis rapidos datos disponibles en tiempo real
Se espera que sea un precio accesible, barato**
4500 nucleotidos aprox.(2014)
Preparacion de bibliotecas facil y rapidamente, autmatizada y facil de usar y versatil
PAC BIO
esta tecnologia permite por primera vez la observacion de la sintesis de DNA, por una DNA polymerasa a medida que ocurre.
Esta tecnologia ofrece largas lecturas a nivel de una sola molecula y un tiempo de obtencion de resultado rapido
Cuenta con una longitud de lectura de hasta 5 KB
Primera generacion
TERMINACION DE CADENA
SECUENCIACION AUTOMATICA
VENTAJAS
Alta calidad de las secuencias en fragmentos largos de hasta 900pb
Es útil para secuencias individuales de fragmentos de DNA de plásmidos de bacterias o amplificado por PCR
DESVENTAJAS
Elevado costo por base
Lo que hace ineficiente para proyectos a gran escala como genomas completos o metagenomas
Segunda generacion
454 PIROSECUENCIACION
Metodo que mide la bioluminisencia producida en la enlongacion de la cadena complementaria de DNA, donde la enzima luciferina se convierte en oxiluciferina,generando un destello de luz captado por una camara.
El destello de luz corresponde a un numero y tipo de nucleotido
Costoso
Lecturas de alrededor de 700 pb
como funciona?
Ion Torrent o Secuenciacion por semiconductores
Se utiliza un ion semiconductor que cada vez que se incorpora un nuevo nucleótido en la cadena, en síntesis, se libera un protón (H+) que modifica el pH
Se repiten varios ciclos
Cada uno de ellos con con la adición de un único nucleótido (A, T, G, C)
ABI SOLID
Es un metodo de secuenciacion por ligacion donde se sustituye la enzima polimerasa por la enzima ligasa junto con una sonda con 2 bases conocidas y 1 fluroforo
El flurofo se excitara por medio de un laser lo cual hara que se desprenda un foton que sera captado por el medidor de fluorescencia
Emplea sondas de 8 nucleotidos, marcadas por 4 colores
Resultados en formato FASTQ
Lecturas cortas y problemas con secuencias palindromicas.
illumina
es una secuenciación por síntesis
su tiempo de corrida es de : 60 millones de Mega bases por dia
sus costos son de:$0.6 por Mega base
y su longuitud de lectura es de: De 50 a 150 pares de bases
la tasa de error puede ser de: 0.5 a 1%
características fenotípicas están codificadas en el genoma de las células