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Aislamiento de Mycobacterium-bovis a partir de un caso de Mastitis Crónica…
Aislamiento de Mycobacterium-bovis a partir de un caso de Mastitis Crónica
Objetivo
Aislamiento de Mycobacterium bovis a partir de leche procedente de una vaca tuberculino- positiva con mastitis crónica de la cual no se habia logrado ninún aislamiento bacteriano
El animal fue sacrificado posteriormente y se realizo el procesó de material de los diferentes órganos comprendidos con lesiones tuberculosas
Revision de literatura
1885,Bang expreso los resultados de sus investigaciones sobre la tuberculosis mamaria
Tumefacción indolora, difusa, que afecta predominantemente los curtos posteriores de la glándula
Examen clínico
induración de los ganglios supramamarios
Tanto los cuartos enfermos, como los aparentemente sanos
Eliminan bacilos tuberculosos
Los cuartos afectados, se engrosan progresivamente, se tornan fibrosas y a menudo, adquieren una consistencia petrea
La secreción láctea suele conservar su aspecto normal (un mes o menos) y luego se torna acuosa,serosa y finalmente turbia amarillenta con coágulos finos
La tuberculosis mamaria se debe usualmente por infección de Mycobacterium bovis
Sin embargo, se han presentado casos de mastitis tuberculosa producida por M.tuberculosis, M.avium y otros germenes saprofitos acidorresistentes
Signos clínicos
5% de las vacas tuberculosas, en casos avanzados tienen lesiones del útero o metritis tuberculosa
1-3% tienen mastitis tuberculosa
Estas presentaciones clínicas tienen gran relevancia ya que influyen en la salud pública y tambien como fuente de infección para terneros que se alimentan conn leche en forma natural o artificial
Tuberculosisi adquirida por vía oral
Principales signos es la tumefacción de los ganglios retrofaríngeos
Para los terneros, su lesión primaria se localiza en los ganglios mesentéricos, sin afectar la musocsa intestinal
Consumo de leche cruda
Vehículo principal para que los bacilos tuberculosos pasen de los animales al hombre
Ya que la pasteurización reduce la frecuencia de presentación de la tuberculosis bovina en el hombre
Pasteurización obligatoria
Ameérica Latina
Al no realizar el proceso de pasteurización , se pueden presentar casos de infección por vía aerogena
Zoonosis
El hombre es un húesped accidental de M. bovis
Su infección depende de la fuente animal
Estudio de muestras de la leche para determinar la existencia de M. bovis y otras micobacterias patógenas para el hombre
Arenas y col, 1947
Aislaron bacilo bovino en 7/50 muestras de leche cruda (En buenos Aires)
Se determino la exisencia de tuberculosis bovina en pacientes del Hospital Muñiz
Kantor y col
Tomaron muestras de sedimenyos de centifugación industrial provenientes de 130.000 litros de leche cruda de la planra pasteurizadora de leche
Se procesaron muestras equivalentes a 95 litros de leche pasteurizada de diversas marcas
Expedidas en la Capital Federal y Provincia de Buenos Aires
Se aislaron microbacterias
M.lactis (7 cepas)
M. chelonei-fortuitum (3 cepas)
M. fortuitum (1 cepa)
Se aislaron 62 cepas de micobacterias
M. Lactis (43 cepas)
M. chelonei-fortuitum (7 cepas)
M. scrofulaceum (4 cepas)
M. chelonei (3 cepas)
M. fortuitum (2 cepas)
M. avium (1 cepa)
M. bovis (2 cepas)
Botero y col
Procesaron 50 muestras de leche cruda en busca de microbacterias atípicas
Resutlados de 9 muestras
M. terrae (1 cepa)
M. fortuitum (3 cepas)
5 cepas clasificadas en el grupo IV o rápidas crecedoras
Materiales y Metodos
Muestra de leche procedente del Valle de Ubaté de una vaca con mastitis crónica que habia presentado reacción positiva a la prueba comparativa de la tuberculina bovina
Procesamiento de la muestra
Centrifugación por 20 minutos a 2.500 rpm
El sedimento se trato con Na0H al 4% durante 20 minutos a 37 °C, para descontaminación
se adicionaron 2 gotas de rojo de feno al 0.5 %
Neutralización con HCL 2N
Centrifugación por 10 minutos a 2.500 rpm
Eliminación del sobrenadante y adición de 4.0 ml de agua destilada estéril
Homogenización y nueva centrifugación por 10 minutos a 2.500rpm
Eliminación del sobrenadante
Adicipón de 4.o ml de agua destilada estéril y homogenización de material
Inoculación de medios de cultivo
Se sembró la suspensión en los medios de Lowenstein-Jensen con piruvaro de sodio. Con glicerina en cantidad de 0.2ml por tubo y se incubó a 37 °C
Observaciónes realizadas a partir del segundo día y se continuaron cada cuatro días, durante dos meses
Inoculación de animales de laboratorio
Se inocularon 2 cobayos y un conejo, cada uno con 0.5 ml de la suspensión de la muestra vía intramuscular
Se observaron cada 5 días, revisando el sitio de incoulación
Antes del proceso de descontaminación se realizaron siembras del sedimento de la leche
Agar sangre ovina al 5% en ambientes aérobicos
Agar Mac Conkey y Agar Sabourad en aerobiosis a 37 °C
Vaca problema
sometida a examen clínico
Sacrificada posteriormente
Colecta de fragmentos de tejidos afectados para estudios histopatológicos y bacteriológicos
Resultados y discusión
Caracteristicas organolépticas de la leche procedada
Cremosa, amarillenta y cóagulos finos
Resultados de la muestra sembrada en medio Lowenstein-Jensen con piruvato de sodio
Cuarte semana- desarrollo de pequeñas colonias, aisladas de color blanco amarillento, de bordes rodeados
Resultados de coloración Ziehl Neelsen
Forma de bacilares ácido-alcohol resistentes
Medio Lowenstein-Jensen con glicerina
No se presento ninún desarrollo
Cultivos de agar dextrosa de Saboreaud
Se descartaron a los 20 días sin observarse crecimiento de gérmenes
Los cobayos inoculados con la leche procesada
Murieron a las 40 y 56 días presentando lesiones generalizadas en
Hígado
Bazo
Pulmones
Ganglios inguinales
Resultados de necropsia al teñirlas con el colorante Ziehl-Neelsen
Impresiones de las vísceras de los animales presentaron la presencia de bacilos ácido.alcohol resistentes ( en citoplasma de macrófagos y en los espacios intercelulares)
Vaca problema
En necropsia, presentó el aumento de tamaño de los ganglios linfáticos supramamarios y mediastínicos con presencia de material caseoso de colo amarillento
Al ser procesado se aisló el M. bovis
Glándula mamaria presento en su parte medial, material caseoso de color amarillo oro y aspecto granulomatosos
Comprometiendo los cuartos posteriores
Estudios histopatologios de la glandula
Indican reacciónes granulomatosas caracterizadas por focos de necrosis de caseificación
Es necesario que los laboratorios de diagnostico Médico Veterinario adopten tecnicas adecuadas para el aismaliento rutinario de micobacterias en casos de mastitis crónica
Es importante realizar estudio de los productos, subropductos y residuos industriales de las plantas procesadoras de leche
Con el fin de determinar el papel que juegan como orientadoras
Detectar focos de tuberculosos