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méthodes en immunologie - Coggle Diagram
méthodes en immunologie
détecter la liaison Ag-Ac de façon visible (c'est généralement l'Ac qu'on veut doser)
immunofluoresence Ac fluorescent
immunoenzymologie
utilise un Ac marqué par une enzyme chromogène qui transforme un substrat incolore en produit coloré (peroxydase généralement), le substrat est aouté en toute fin de réaction
immunoradiologie Ac radioactif
chacune de ces méthodes peut être
directe
contact direct entre un Ag et un Ac marqué
sandwich
Ac fixé sur une phase, fixe l'Ag à doser et un autre Ac marqué fixe un autre épitope du même Ag c'est une méthode sensible et spécifique puisqu'elle utilise deux épitopes du même Ag, inutilisable pour les haptènes
double sandwich
semblable à la technique sandwich sauf que l'Ac marqué est un Ac anti Ac
modification physique de l'Ag
agglutination
utilisée pour les Ag présents sur de grosses particules, sa réalisation est aisée avec les bactéries et les érythrocytes
hémagglutination directe
pour détecter l'Ag déjà présent sur le globule rouge
hémagglutination passive
on fixe un Ag spécifique de l'Ac à tester sur le GR
précipitation
la réaction Ag Ac peut former un précipité en fonction de l'affinité Ag Ac et des concentrations respectives de chacun d'eux
en milieu liquide
Néphélémétrie
en milieu gélifié
immunodiffusion
immunoélectrophorèse
réactions utilisant le complément
on met un Ag en présence d'un Ac puis on ajoute le complément qui sera fixé au complexe Ac-Ag, puis on dose l'activité du complément en présence d'hématies du mouton, si le complément est consommé, il n'y a pas d'hémolyse et donc le taux d'Ag-Ac est élevé
utilisation des Ac dans la détection des Ag cellulaires et tissulaires
immunofluorescence
IFI
un Ac spécifique est fixé sur l'Ag de la coupe tissulaire, un Ac fluorescent anti Ac spécifique est utilisé pour la révélation et le tout est analysé au microscope fluorescent
IFD
l'anticorps fluorescent spécifique fixe l'Ag sur une coupe tissulaire et est ensuite analysé au microscope fluorescent pour MEE l'Ag
immunohistochimie
même principe que IFI avec un Ac enzymomarqué au lieu d'un Ac fluorescent
immuno-électrophorèse
Western Blot
on prend les cell productrices de l'Ag à doser et on les lyse puis mises en électrophorèse et migrent selon leur poids moléculaire on ajoute l'Ac et on fixe les complexes Ag-Ac par des Ag marqués
immunoprécipitation
on incube une cellule productrice de l'Ag à doser avec des AA radioactifs donc production d'Ag protéique radioactif, puis lyse cellulaire pour libérer l'Ag à doser et ajout des Ac puis de plusieurs substances puis électrophorèse on aura migration des prot selon leur poids moléculaire