Mapa Mental da Biologia Molecular - Conhecimentos

PCR

Tecnologia do DNA recombinante

Eletroforese Eletroforese

Sequenciamento :

Tecnica utilizada para identificação de fragmentos de DNA

Maxam-Gilbert

Técnica de separação de moléculas

DNA template

Sofre influência de um campo elétrico

Utiliza uma cuba com eletrodos

Tampão da amostra tampao

Pelo tamanho

Enzimas de restrição

Southern Blotting

Para visualizar e monitorar a corrida eletroforética

Northern Blotting

Utiliza-se um controle

Corantes para detecção

Western Blotting

AMBIENTE X GENÉTICA

Brometo de etídeo

Nitrato de prata

Comassie Blue

Autorradiografia

dNTP

separação de fitas por eletroforese

separação do DNA em nucleotídeos

Marcação e dissoclação de fitas

Variantes

taq DNA polimerase

Conjunto de técnicas que permite combinar um DNA de um organismo com um DNA de uma fonte diferente

Eletroforese em campo pulsado

eletroforese capilar eletroforese capilar

gel para RNA

native-page

SDS-page

Endonucleases

Exonucleases

Termociclador

Quebram ligações de fosfodiéster no interior da molécula

Removem um nucleotídeo de cada vez, começando na extremidade

eletroforese de fragmentos

Primer

Sanger

método enzimatico

método de terminação de cadeia

click to edit

Solução tampão

EcoRI

HindIII

Tecnica utilizada para identificação de fragmentos de RNA

Enzima Hae III

Iniciadores

Técnica usada para separação de moléculas proteicas

Reconhece a sequência GG-CC

Reconhece a sequência G-AATTC

dímero de primer

Reconhece a sequência A-AGCTT

amplificação

Fragmentação da molécula de DNA por meio de digestão por enzimas de restrição

Desenho de primer image

Não há necessidade de utilizar enzimas de restrição, pois as moléculas de RNA são naturalmente menores

Íons MgCl2

FWD

aquele que se liga na região 3OH' - primer 1

Cofator da DNA polimerase

REV

Etapas de clonagem gênica

segundo primer

O ideal são nucleotideos de 18 a 30

  1. A DNA ligase liga os fragmentos de DNA no plasmídeo
  1. Transformação: Processo em que introduz o plasmídeo na bactéria
  1. As enzimas de restrição cortam uma parte do DNA que será clonado (inserto)
  1. Seleção das bactérias que receberam o plasmídeo; seleção feita através de um marcador adicionado ao plasmídeo

Temperatura de melting

Fragmentos de diferentes tamanhos são separados por eletroforese

não pode ser muito diferente entre si

Fragmentos de diferentes tamanhos são separados por eletroforese

Temperatura de anelamento

Fragmentos de diferentes tamanhos são separados por eletroforese

O resultado da eletroforese é transferido para uma membrana de nitrocelulose.

Regra de alguém que não lembro o nome

Tm = 4(G+C) + 2 (A+T)

Essa membrana é submetida a um processo de identificação das moléculas impregnadas nele. Pode ser por identificação química ou física (radiação).

image

Desnaturação da fita

image

Aplicações

análise de efeitos de hormônios e drogas

Anelamento

Extensão

Aplicação:

Hormônio do crescimento

dinucletídeo trifosfato

Produção do hormônio hGH

DNA molde

Nutrigenomica

  1. É adicionado em um plasmídeo o gene que codifica a produção de hGH
  1. O plasmídeo é inserido em uma bactéria, e essa bactéria passará a produzir o hormônio HG, através de um indutor químico no meio de cultura

Estuda a influencia das moléculas e nutrientes ingeridos pela alimentação sobre a expressão genica

  1. Depois, as bactérias são quebradas para extração do hormônio.
  1. É feito um tratamento nesse hormônio para atingir o grau de pureza exifgido para o uso terapêutico

Essa interação ocorre atraves da modulação da ativação ou silenciamento dos genes (epigenético). Não ocorre mudanças diretas na molécula de DNA

Nutrigenética

Modo como nosso organismo reage aos nutriente e moléculas bioativas presente na alimentação

quando adiciona algum nucleotídeo (n lembro o nome) e depois não tem como adicionar outro na cadeia

Manual

Varia de acordo com as características genéticas de cada individuo. Um exemplo é a diferença presente entre cada população ao redor do mundo. Povos asiáticos possuem uma maior expressão de genes responsáveis pela codificação de enzimas que digerem amido, quando comparados com povos ocidentais.

automatizado

capilar

Ácido nucléico

DNA

RNA

click to edit

AUGC

Fita simples

Fita dupla

ATGC

Síntese de RNA