Mapa Mental da Biologia Molecular - Conhecimentos
PCR
Tecnologia do DNA recombinante
Eletroforese
Sequenciamento :
Tecnica utilizada para identificação de fragmentos de DNA
Maxam-Gilbert
Técnica de separação de moléculas
DNA template
Sofre influência de um campo elétrico
Utiliza uma cuba com eletrodos
Tampão da amostra
Pelo tamanho
Enzimas de restrição
Southern Blotting
Para visualizar e monitorar a corrida eletroforética
Northern Blotting
Utiliza-se um controle
Corantes para detecção
Western Blotting
AMBIENTE X GENÉTICA
Brometo de etídeo
Nitrato de prata
Comassie Blue
Autorradiografia
dNTP
separação de fitas por eletroforese
separação do DNA em nucleotídeos
Marcação e dissoclação de fitas
Variantes
taq DNA polimerase
Conjunto de técnicas que permite combinar um DNA de um organismo com um DNA de uma fonte diferente
Eletroforese em campo pulsado
eletroforese capilar
gel para RNA
native-page
SDS-page
Endonucleases
Exonucleases
Termociclador
Quebram ligações de fosfodiéster no interior da molécula
Removem um nucleotídeo de cada vez, começando na extremidade
eletroforese de fragmentos
Primer
Sanger
método enzimatico
método de terminação de cadeia
click to edit
Solução tampão
EcoRI
HindIII
Tecnica utilizada para identificação de fragmentos de RNA
Enzima Hae III
Iniciadores
Técnica usada para separação de moléculas proteicas
Reconhece a sequência GG-CC
Reconhece a sequência G-AATTC
dímero de primer
Reconhece a sequência A-AGCTT
amplificação
Fragmentação da molécula de DNA por meio de digestão por enzimas de restrição
Desenho de primer
Não há necessidade de utilizar enzimas de restrição, pois as moléculas de RNA são naturalmente menores
Íons MgCl2
FWD
aquele que se liga na região 3OH' - primer 1
Cofator da DNA polimerase
REV
Etapas de clonagem gênica
segundo primer
O ideal são nucleotideos de 18 a 30
- A DNA ligase liga os fragmentos de DNA no plasmídeo
- Transformação: Processo em que introduz o plasmídeo na bactéria
- As enzimas de restrição cortam uma parte do DNA que será clonado (inserto)
- Seleção das bactérias que receberam o plasmídeo; seleção feita através de um marcador adicionado ao plasmídeo
Temperatura de melting
Fragmentos de diferentes tamanhos são separados por eletroforese
não pode ser muito diferente entre si
Fragmentos de diferentes tamanhos são separados por eletroforese
Temperatura de anelamento
Fragmentos de diferentes tamanhos são separados por eletroforese
O resultado da eletroforese é transferido para uma membrana de nitrocelulose.
Regra de alguém que não lembro o nome
Tm = 4(G+C) + 2 (A+T)
Essa membrana é submetida a um processo de identificação das moléculas impregnadas nele. Pode ser por identificação química ou física (radiação).
Desnaturação da fita
Aplicações
análise de efeitos de hormônios e drogas
Anelamento
Extensão
Aplicação:
Hormônio do crescimento
dinucletídeo trifosfato
Produção do hormônio hGH
DNA molde
Nutrigenomica
- É adicionado em um plasmídeo o gene que codifica a produção de hGH
- O plasmídeo é inserido em uma bactéria, e essa bactéria passará a produzir o hormônio HG, através de um indutor químico no meio de cultura
Estuda a influencia das moléculas e nutrientes ingeridos pela alimentação sobre a expressão genica
- Depois, as bactérias são quebradas para extração do hormônio.
- É feito um tratamento nesse hormônio para atingir o grau de pureza exifgido para o uso terapêutico
Essa interação ocorre atraves da modulação da ativação ou silenciamento dos genes (epigenético). Não ocorre mudanças diretas na molécula de DNA
Nutrigenética
Modo como nosso organismo reage aos nutriente e moléculas bioativas presente na alimentação
quando adiciona algum nucleotídeo (n lembro o nome) e depois não tem como adicionar outro na cadeia
Manual
Varia de acordo com as características genéticas de cada individuo. Um exemplo é a diferença presente entre cada população ao redor do mundo. Povos asiáticos possuem uma maior expressão de genes responsáveis pela codificação de enzimas que digerem amido, quando comparados com povos ocidentais.
automatizado
capilar
Ácido nucléico
DNA
RNA
click to edit
AUGC
Fita simples
Fita dupla
ATGC
Síntese de RNA