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Preparación de muestra, Integrantes, *Protocolo con xileno 12 hrs -…
Preparación de muestra
Procesamiento
2.1 Fijación con formalina
2.2 Deshidratación con etanol
2.3 Aclaramiento con xilol
2.4 Infiltración con parafina
Corte
3.1 Freír la superficie del bloque
3.2 Montar la muestra en laminillas
3.3 Montarlo en el microtomo
3.4 Acercar la muestra a las cuchillas poco a poco
3.5 Cortar
3.6 Sumergir tejido en etanol
3.7 Seccionar
3.8 Poner en la laminilla en una plancha caliente para desparafinar
Embebido
3.1 Preparar los moldes (de acero) y calentar las pinzas
3.2 Llevar hasta el fondo del molde los tejidos (evitar burbujas)
3.3 Enfríar el molde para que se solidifique la parafina
3.4 Evitar compactación de tejidos
Preparación
1.1 Obtención de muestra
1.1.2 Preservación
1.2.1 Muestra se sumerge en fijador (formalina)
Proteinas mantienen capacidad de reaccionar con anticuerpos
Conserva
Estructura de la célula
Estructuras extracelulares
1.1.3 Identificación
Informe de hallazgos macroscópicos (empieza en posición anatómica)
Describir forma anatomía comparativa entre un órgano sano y patológico
Tomar las medidas del órgano y de quistes (en caso de estar presentes).
Tomar muestras de estructuras principales del órgano y de sus anormalidades, en caso de presentarlas.
1.1.4 Documentación y grossing (tallado)
Morfofisiología reportada sobre el órgano
Dibujo esquemático sobre el órgano recibido
Colocación de cortes seccionados de la muestra dentro de cassettes.
1.2 Fase analítica
1.2.1 Fijación
a) Físicos
Calor
Estudio citológico
Frotis sanguíneo.
b) Químicos
Inmersión (10 a 1 o 20 a 1)
Perfusión
Con formaldehído
1.3 Deshidratación
Soluciones de alcohol etílico de concentraciones crecientes hasta llegar al 100%.
1.4 Aclaramiento
Más común con xilol y tolueno
1.5 Infiltración
Parafina
Permite cortes de 5-15 µm
Da consistencia firme
Resina epoxi (MET)
Permite cortes de 50-150 nm
Tinción
Montaje
Análisis microscópico
Digitalización
Almacenamiento
Integrantes
Arantxa Gabriela López Santiago A01366226
Joselyn Ruth Cruz Díaz A01365831
Héctor Manuel Marmolejo Bedolla A01637940
Mariano Alcantar Peñaloza A01066991
Sherlyn Monserrat Rodriguez Sanchez A01067003
*Protocolo con xileno 12 hrs