Please enable JavaScript.

Coggle requires JavaScript to display documents.

Técnica histológica ordinaria, Paulina de la Mora Neuenschawander…

- - - - Interpretación detallada
        
        Microscopio electrónico (ME)
        
        Resolución mayor y aumento más útil
        
        ME de Transmisión (MET)
        
        ME de Barrido (MEB)
        
        Microscopio de Fuerza Anatómica (MFA)
      - Técnicas auxiliares
        
        Varios métodos de tinción
        
        Histoquímica y citoquímica
        
        Técnicas de inmunocitoquímica y de hibridación
        
        Autorradiografía
        
        Cultivo de tejidos y órganos
        
        Separación de células y orgánicos por centrifugación diferencial
        
        Preparación titular especializada
        
        Técnicas microscópicas especializadas
        
        Sistemas ópticos especializados
    - - Ayuda a describir la organización y función celular
    - - Microscopios ópticos
      - Microscopía virtual
        
        Observación de muestras microscópicas en la pantalla de un equipo electrónico
- - - - Nucleoproteínas
      - Proteínas intracelulares del citoesqueleto
      - Proteínas extracelulares
      - Complejos de fosfolípidos y proteínas (o hidratos de carbono) en las membranas
    - - Glucógeno
      - Proteoglucanos y glucosaminoglucanos
        
        Pueden conservarse usando fijadores no acuosos para el glucógeno o añadiendo agentes ligadres especiales a la solución fijadora
    - - Pueden conservarse y detectarse mediante técnicas específicas
      - Aportan información sobre metabolismo celular, transporte activo y procesos vitales de las células.
  - - - Eosina
      - Reacciones con grupos catiónicos en células y tejidos
      - Acidofilia
      - Tiñen selectivamente el citoplasma y fibras extracelulares
        
        Es atribuible a factores relativos
        
        Tamaño y grado de acumulación de moléculas del colorante
        
        Permeabilidad y "densidad" del tejido
      - La tinción es menos específica, pero más sustancias dentro de las células y matriz extracelular presentan acidofilia.
        
        Filamentos citoplasmáticos (en especial células musculares)
        
        Componentes membranosos intracelulares
        
        Fibras extracelulares (principalmente a causa de grupos amino ionizados)
    - - Hematoxilina (tiene propiedades semejantes a los colorantes básicos)
        
        Se usa como mordiente (intermediario entre el componente del tejido y la anilina)
        
        Unión en complejo tejido-moridente-hematoxilina
        
        Tiñe los núcleos
      - Reaccionan con componentes aniónicos de las células y tejidos (tienen carga negativa).
        
        Componentes aniónicos incluyen: grupos fosfato, ácidos nucleicos, grupos sulfato de los glucosaminoglicanos y grupos carboxilo de proteínas.
        
        Reacción según el pH
        
        pH alto (cerca de 10)
        
        Reacción con colorante mediante uniones electrostáticas.
        
        pH ligeramente ácido a neutro (5 a 7)
        
        Reacción con anilina básica a través de uniones electroestáticas.
        
        pH alto (inferior a 4)
        
        Mantienen ionizados grupos sulfato y reaccionan con colorantes básicos.
      - Metacromasia
        
        El mecanismo subyacente para el cambio de absorbancia es la presencia de polianiones en el tejido.
        
        Se forman aglomerados diméricos y poliméricos
      - Fucsina básica decolorada
        
        Es la base de reacciones de:
        
        ácido peryódico-reactivo de Schiff (PAS)
        
        Tiñe hidratos de carbono y macromoléculas con abundancia de ellos
        
        Hidrólisis débil con ácido clorhídrico para teñir ADN
        
        Esta tinción se basa en el contenido o asociación de proteoglucanos.
        
        Reacción de Fuelgen
        
        Se basa en la separación de purinas de la desoxirribosa de DNA mediante hidrolisis ácida débil.
    - - Puede usarse para confirmar la identidad del material que se tiñe
        
        Material que se tiñe con reacción Pas
        
        Se identifica como glucógeno por el tratamiento previo de los cortes con diastasa o amilasa
        
        Falta de tinción después del tratamiento
        
        Identifica positivamente el material teñido como glucógeno
- - - - Características
        
        Sirve para conservar la estructura
        
        Se logra mediante una sustancia química o una mezcla de estas
        
        Las muestras se sumergen en el fijador después de extraerse
        
        El primer paso en la preparación de una muestra de tejido u órgano
      - Funciones
        
        Detener el metabolismo celular
        
        Impedir degradación enzimática de las células
        
        Destruir microorganismos patógenos
        
        Endurecer el tejido
        
        Formación de enlaces cruzados
        
        Desnaturalización de moléculas de proteínas
      - Fijador más habitual
        
        Formalina
        
        Formaldehído al 37%
        
        Conserva la estructura general de la célula
        
        Proteínas mantienen su capacidad para reaccionar con anticuerpos específicos
        
        En diluciones variadas y en combinación con otras sustancias químicas y amortiguadores
    - - En el segundo paso, la muestra se prepara para su inclusión en parafina con el fin de permitir su corte
      - Permite realizar cortes muy finos
      - Pasos
        
        1.- Fijación
        
        2.- Se lava la muestra
        
        3.- Se deshidrata la muestra
        
        En una serie de diluciones de alcohol
        
        Sirve para remover el agua
        
        4.- Aclaramiento
        
        Se utilizan solventes orgánicos
        
        Xileno o tolueno
        
        5.- Corte
        
        Cuando la parafina fundida se endurece, se realiza el corte
        
        6.- Montaje
        
        Los cortes obtenidos se ponen en el portaobjetos
        
        Se les coloca un medio de montaje
        
        Solución que mantiene la muestra unida al vidrio
    - - Pasos
        
        Tejidos se re hidratan en una serie de disoluciones de alcohol
        
        Concentración decreciente
        
        El tejido del portaobjetos se tiñe con hematoxilina
        
        La parafina debe disolverse y extraerse en xileno o tuoleno
        
        Se deshidrata la muestra con concentraciones alcohólicas
        
        Concentración creciente
        
        Se tiñe con eosina y alcohol
      - El tercer paso es teñir la muestra para su observación
  - - - Diluyen los lípidos neutros
    - - Conservan las estructuras de la membrana
      - Permangamato y osmio
    - - Conservan los lípidos neutros
      - Utilizado en células adiposas
  - - - Para material elástico e impregnación argéntica
        
        Fibras reticulares
        
        Membranas basales
    - - Elastina, fibras reticulares, membranas basales y lípidos