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Immunochimica - Coggle Diagram

- - - - Saggio Elisa
        
        Metodo ELISA
        
        Ha fine di
        
        Rilevamento
        
        Di una sostanza specifica all'interno di un campione
        
        Identificazione
        (Sia qualitativa che quantitativa)
        
        Si basa sull'utilizzo di anticorpi marcati con un enzima
        
        L'enzima produrrà una colorazione osservabile
        
        E quantificabile con lo spettrofotometro
        
        2 modi per effettuare il saggio
        
        Elisa diretto o a "sandwich"
        
        Fissaggio al substrato dell’anticorpo primario specifico per l’antigene da ricercare;
        
        Lavaggio per eliminare l’eccesso di anticorpo;
        
        Aggiunta del campione da saggiare per la presenza o meno dell’antigene;
        
        Lavaggio per togliere antigeni in eccesso;
        
        Aggiunta di un anticorpo secondario specifico per l’antigene coniugato a un enzima specifico (perossidasi o fosfatasi alcalina).
        
        Lavaggio con soluzione tampone dell’eccesso;
        
        Aggiunta del substrato per l’enzima coniugato all’anticorpo che porterà alla formazione di un prodotto colorato;
        
        Elisa Indiretto
        
        Fissaggio al substrato dell’antigene specifico per l’anticorpo che vogliamo misurare;
        
        Lavaggio per eliminare l’eccesso di antigene;
        
        Aggiunta del siero (campione) che si vuole saggiare per ricercare la presenza di anticorpi;
        
        Lavaggio per eliminare l’eccesso di anticorpi che non hanno legato l’antigene;
        
        Aggiunta di un anti-anticorpo, cioè un anticorpo secondario marcato con un enzima che legherà, se presenti, gli anticorpi nel campione;
        
        Lavaggio per eliminare eventuali anticorpi non legati al complesso;
        
        Aggiunta del substrato dell’enzima con cui è stato marcato l’anti-anticorpo: un cambiamento di colore indica la presenza degli anticorpi nel siero