RECURSOS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA SOLICITADOS PARA LLEGAR AL AGENTE ETIOLÓGICO:
Perfil hepatitis A, B y C: En un perfil de hepatitis aguda se agrupan varias pruebas en sangre que son de ayuda para establecer el diagnóstico de hepatitis vírica. Algunas de las pruebas detectan anticuerpos producidos por el sistema inmune en respuesta a la infección y otras detectan antígenos (proteínas) indicativos de la presencia del virus.
Se basa en la demostración de anticuerpos anti o antígenos por enzimoinmunoanálisis y detección de ARN viral por técnicas moleculares.
El perfil de hepatits aguda incluye las siguientes pruebas:
Hepatitis A, anticuerpo de tipo Inmunoglobulina M (IgM-VHA).
Hepatitis B, anticuerpo de tipo IgM frente al antígeno del core (anti-HBc).
Hepatitis B, antígeno de superficie (HBsAg).
Hepatitis C, anticuerpo (anti-VHC).
PCR (Reacción en cadena de la polimerasa): Es una técnica de amplificación del genoma de ADN (RT-PCR para genomas de ARN). Amplifica copias simples de ADN vírico varios millones de veces y constituye una de las técnicas más útiles del análisis genético. Tiene una sensibilidad tan alta que puede amplificar una única molécula de DNA y una sola copia de genes puede ser extraída, de mezclas complejas de secuencias genómicas y visualizada como bandas diferentes en geles de agarosa.
Enzimoinmunoanálisis (EIA): Los EIA para la detección de antígeno se basan habitualmente en la captura del antígeno por anticuerpos específicos unidos a una fase sólida, en general el pocillo de una microplaca o una pequeña esfera de plástico. El antígeno viral presente en la muestra clínica se combina con el anticuerpo fijado a la fase sólida y el antígeno viral se detecta mediante la adición de otro anticuerpo específico conjugado a una enzima.
Los EIA indirectos se han aplicado de forma amplia en los últimos años al diagnóstico de anticuerpos virales. Los antígenos virales se inmovilizan sobre una fase sólida (esferita, policubetas para microtitulación u otros elementos de plástico) y se agregan los sueros en estudio; se incuban, se lavan y se revela la reacción Ag-Ac por el agregado de una inmunoglobulina antiespecie conjugada con una enzima,seguida por el substrato apropiado para esta.