RECURSOS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA SOLICITADOS PARA LLEGAR AL AGENTE ETIOLÓGICO:
PCR (Reacción en cadena de la polimerasa): Es una técnica de amplificación del genoma de
ADN (RT-PCR para genomas de ARN). Amplifica copias simples de ADN vírico varios millones de veces y constituye una de las técnicas más útiles del análisis genético. Tiene una sensibilidad tan alta que puede amplificar una única molécula de DNA y una sola copia de genes puede ser extraída, de mezclas complejas de secuencias genómicas y visualizada como bandas diferentes en geles de agarosa.
Microscopía electrónica: Mediante el microscopio electrónico es posible observarla morfología de los viriones presentes en muestras clínicas. La limitación del método además del costo del microscopio, es que necesita de una alta concentración de viriones (aproximadamente 109 partículas virales/ml,dependiendo del virus) presentes en la muestra, por ello es poco sensible.
Test de aglutinación: El test de aglutinación es un método simple, de un solo paso, que a veces se usa para la detección de antígenos virales en muestras clínicas. Los ensayos de aglutinación, dependen de la fijación inicial de anticuerpos antivirales específicos sobre eritrocitos o partículas de látex. Luego este reactivo se incuba con la muestra clínica en la cual se investiga el antígeno y las partículas se aglutinan si el antígeno adecuado se encuentra presente. Ha sido usado para detectar antígeno de Rotavirus en heces (el más importante) mostrando una buena sensibilidad cuando se lo comparacon el EIA para Rotavirus. Además es una técnica rápida y barata.
Electroforesis en gel: La electroforesis en gel es una técnica utilizada para separar fragmentos de ADN (u otras macromoléculas, como ARN y proteínas) por su tamaño y carga. La electroforesis consiste en aplicar una corriente a través de un gel que contiene las moléculas de interés. Con base en su tamaño y carga, las moléculas se desplazarán por el gel en diferentes direcciones o a distintas velocidades, con lo que se separan unas de otras.