RECURSOS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA SOLICITADOS PARA LLEGAR AL AGENTE ETIOLÓGICO:
PCR (Reacción en cadena de la polimerasa): Es una técnica de amplificación del genoma de ADN (RT-PCR para genomas de ARN). Amplifica copias simples de ADN vírico varios millones de veces y constituye una de las técnicas más útiles del análisis genético. Tiene una sensibilidad tan alta que puede amplificar una única molécula de DNA y una sola copia de genes puede ser extraída, de mezclas complejas de secuencias genómicas y visualizada como bandas diferentes en geles de agarosa.
RIDTs (Pruebas de diagnóstico rápido de influenza): Son inmunoensayos que pueden identificar la presencia de antígenos nucleoproteicos virales de la influenza A y B en muestras respiratorias y que exponen el resultado de forma cualitativa (positivo contra negativo). Pueden dar resultados en un periodo clínicamente relevante, es decir, en menos de 15 minutos. No obstante, la sensibilidad de las RIDT es limitada para detectar los virus de la influenza en especímenes respiratorios, en relación con la RT-PCR o cultivo viral, y los resultados negativos de una prueba RIDT se deben interpretar con cautela dado el potencial de obtener resultados falsos negativos.
Inmunofluorescencia directa: Muestras clínicas apropiadas son recolectadas y colocadas sobre portaobjetos donde se dejan secar y fijar. Luego se agregan anticuerpos especificos marcados con isotiocianato de fluoresceína que difunden a través de la membrana celular y se combinan con los antígenos víricos en el interior de las células. La reacción antígeno anticuerpo se visualiza con el microscopio de fluorescencia, por la aparición de fluorescencia de color verde manzana.
Enzimoinmunoanálisis (EIA): Los EIA para la detección de antígeno se basan habitualmente en la captura del antígeno por anticuerpos específicos unidos a una fase sólida, en general el pocillo de una microplaca o una pequeña esfera de plástico. El antígeno viral presente en la muestra clínica se combina con el anticuerpo fijado a la fase sólida y el antígeno viral se detecta mediante la adición de otro anticuerpo específico conjugado a una enzima. La enzima conjugada suele ser peroxidasa o fosfatasa alcalina. El substrato para esas enzimas varía. En la reacción con la peroxidasa el substrato es un peróxido capaz de oxidar un compuesto químico incoloro que en su forma oxidada tiene un color característico.