Métodos para el diagnóstico de los virus

Métodos directos

Métodos indirectos

Microscopia electronica

Citología e histología

Detección de antígenos

Deteccion de acidos nucleicos

Cultivo celular

Pruebas inmunológicas

Detección de antígenos específicos

Conjugado con una molécula marcada

Fluroceina

Enzimas

Peroxidasas

Fosfatasa

Biotina-avidina

Efecto citopático

Cambios morfológicos característicos producidos por algunos virus cuando infectan células de tejidos o en cultivo.

Color verde manzana

Sondas

Manifestaciones

Hibridación in situ

Captura hibrida

Técnicas de amplificación

Señal

Blanco

cDNA

PCR

RT-PCR

NASBA

Emplea secuencias cortas de nucleotidos sinteticos(primers)

Hibridan DNA desnaturalizados

  • Lisis celular
  • Necrosis
  • Hiperplasia celular: alteraciones morfológicas
  • Citomegalia: citoplasma reducido, núcleo grande
  • Formación de sincicios: fusión celular
  • Redondeamiento celular
  • Formación de racimos de células
  • Producción de cuerpos de inclusión
  • Vacuolización

Se utiliza una enzima (Tab pol)

Tejidos

Agregación de anticuerpos específicos

citologia

Formación de agregados de partículas

Técnicas útiles para identificar el efecto citopático

Detección de antígeno mediante la captura del
antígeno por anticuerpos específicos

Dx clínico del laboratorio

VIH

HTLV 1 y 2

Atraves del microscopio electrónico se observa la morfología de los viriones

Titulación de virus en cultivo celular, cultivo celular, microscopia óptica y microscopia electrónica.

Virus de la hepatitis

Arbovirus

Papanicolau

Giemsa

H y E

Métodos para el diagnóstico por aparatos y sistemas

Se emplean cultivos celulares

Línea celular primaria

ELISA

Captura antígeno

El antígeno de la muestra clínica se combina con el anticuerpo y el antígeno viral se detecta mediante la adición de otro anticuerpo
específico conjugado a una enzima (peroxidasa o
fosfatasa alcalina).

Competitiva

La hematoxilina tiñe de violeta azulado intenso los ribosomas, la cromatina dentro del núcleo y otras estructuras.

Indirecta

Línea celular finita

Respiratorio

SNC

VHC

Línea celular continua

La eosina tiñe de rosa anaranjado o rojizo el citoplasma, la pared celular, el colágeno, el tejido conjuntivo y otras estructuras que rodean y sostienen la célula.

Encefalitis

Leucoencefalopatía
multifocal progresiva

HBcAb

ayuda a identificar diferentes tipos de células y tejidos, y a obtener información importante sobre las características, la forma y la estructura celular de una muestra de tejido. Se usa para el diagnóstico de enfermedades como el cáncer.

Sandwich

Se inicia de células o tejidos tomado directamente de un organismo, cuando se subcultiva se convierte en una línea celular

HBsAg

Captura IgM

Del RNA blanco mediante transcipción reversa se obtiene cDNA

Aquella que se obtiene con pocos pases o subcultivos (20-50)

se emplea una RNA polimerasa del bacteriofago T7

VEB

Es aquella que puede subcultivarse in vitro de forma indefinida (establecida)

pueden detectarse y cuantificarse virus RNA como VIH Y CMV

mas sensibles

anticuerpos fluorescentes

VHA-M

permite la observación de estructuras específicas de las células. Esta técnica tiñe los citoplasmas, núcleos, nucléolos, vacuolas y gránulos de las células, pudiéndose distinguir incluso finas trazas de cromatina.

AntiHBs

Meningitis

Enteroviruses → RT-PCR, cultivo

VCML → Inmunología

VHS-2 → PCR

Se colorea con ella material obtenido de aparato digestivo como esófago, hígado, páncreas, vías biliares así como aparato respiratorio (esputos, lavados bronquiales y bronquioloalveolares, punciones transcarinales y de pulmón), punciones de diversos órganos (tiroides, glándulas salivales, mama, abdominales, tejido linfático), líquidos de cavidades (asscítico, pleural, pericárdico y otros) líquido céfalo raquídeo.

PCR

VHS -1

VVZ

VEB

CMV

EQUIPO 7
Integrantes


González Tovar Wendy Magali
Medina Sánchez José Francisco
Martínez Robles Ángel Emmanuel
Vázquez Nieto Yetzelzin Carolina
De la Cruz Tolentino Diana Julissa

Arboviruses → Inmunología, RT-PCR

Rabia → Histología, AF

VIH → Histología, RT-PCR

Fiebre hemorrágica → ME, AF, cultivo

Reacción antígeno-anticuerpo, la cual se hace visible por medio de un colorante fluorescente incorporado al sistema.

Paperas

Sarampión

VJC PCR, histología

Rinitis, coriza

Cultivo, AF, EIA

VSR

Influenza

Cultivo, AF

Adenoviruses

Parainfluenza

Se usa en la aglutinación, la precipitación y la fijación del complemento; los anticuerpos fluorescentes pueden ser seleccionados como el cuarto procedimiento, más importante en el laboratorio clínico.

Cultivo

Rhinoviruses

Coronaviruses → ME

Enteroviruses → RT-PCR, cultivo

Faringitis

Adenoviruses → Cultivo, AF

VHS → Cultivo

VEB → Inmunología

Enteroviruses → RT-PCR, cultivo

Gatrointestinal

Diarrea

Croup

VSR → Cultivo, AF, EIA

Parainfluenza → Cultivo, AF

Rotavirus → EIA

Adenovirus → EIA

Norwalk ME

Astrovirus ME

CMV → Histología, cultivo

Bronquiolitis

Cultivo, AF, EIA

Parainfluenza → Cultivo, AF

Influenza

VSR

Ocular

Neumonía

Conjuntivitis

Cultivo, AF, EIA

VSR

Keratoconjuntivitis

Influenza

Coriorretinitis

Cultivo, AF

Parainfluenza
Adenoviruses

Adenoviruses → Cultivo, AF

Cardíaco

Enteroviruses → Cultivo, RT-PCR

Miocarditis,
pericarditis

Enteroviruses RT-PCR, cultivo

Adenoviruses → Cultivo, AF

HSV→ Cultivo, AF

VZV → Cultivo, AF

Urogenital

PCR

Enteroviruses

CMV → PCR

VZV → PCR

BK

Adenoviruses (Tipo 11)

VPH → Captura híbrida,
histología

Molluscum
contagiosum → Histología

Adenoviruses → Cultivo

Hepático

Hepatitis

VHA→ Inmunología

VHB→ Inmunología, EIA, cDNA, PCR

VHC→ Inmunología, RTP-CR

VHD→ Inmunología

VHE→ Inmunología, ME

CMV→ Histología, cultivo, AN

VEB→ Inmunología

Parvovirus→ B19 PCR, inmunología, histologia

Cutáneo

Rash vesicular

Rash
maculopapular

AF, cultivo, PCR

VHS

VVZ

Enteroviruses --> RT-PCR, cultivo

Poxviruses --> Cultivo, ME,
Inmunología

Enteroviruses --> RT-PCR, cultivo

Adenoviruses --> Cultivo

Sarampión --> Inmunología, cultivo

Rubéola--> Inmunrología, cultivo

VHH-6 PCR

Parvovirus B19 PCR, inmunología : :