Métodos para el diagnóstico de los virus
Métodos directos
Métodos indirectos
Microscopia electronica
Citología e histología
Detección de antígenos
Deteccion de acidos nucleicos
Cultivo celular
Pruebas inmunológicas
Detección de antígenos específicos
Conjugado con una molécula marcada
Fluroceina
Enzimas
Peroxidasas
Fosfatasa
Biotina-avidina
Efecto citopático
Cambios morfológicos característicos producidos por algunos virus cuando infectan células de tejidos o en cultivo.
Color verde manzana
Sondas
Manifestaciones
Hibridación in situ
Captura hibrida
Técnicas de amplificación
Señal
Blanco
cDNA
PCR
RT-PCR
NASBA
Emplea secuencias cortas de nucleotidos sinteticos(primers)
Hibridan DNA desnaturalizados
- Lisis celular
- Necrosis
- Hiperplasia celular: alteraciones morfológicas
- Citomegalia: citoplasma reducido, núcleo grande
- Formación de sincicios: fusión celular
- Redondeamiento celular
- Formación de racimos de células
- Producción de cuerpos de inclusión
- Vacuolización
Se utiliza una enzima (Tab pol)
Tejidos
Agregación de anticuerpos específicos
citologia
Formación de agregados de partículas
Técnicas útiles para identificar el efecto citopático
Detección de antígeno mediante la captura del
antígeno por anticuerpos específicos
Dx clínico del laboratorio
VIH
HTLV 1 y 2
Atraves del microscopio electrónico se observa la morfología de los viriones
Titulación de virus en cultivo celular, cultivo celular, microscopia óptica y microscopia electrónica.
Virus de la hepatitis
Arbovirus
Papanicolau
Giemsa
H y E
Métodos para el diagnóstico por aparatos y sistemas
Se emplean cultivos celulares
Línea celular primaria
ELISA
Captura antígeno
El antígeno de la muestra clínica se combina con el anticuerpo y el antígeno viral se detecta mediante la adición de otro anticuerpo
específico conjugado a una enzima (peroxidasa o
fosfatasa alcalina).
Competitiva
La hematoxilina tiñe de violeta azulado intenso los ribosomas, la cromatina dentro del núcleo y otras estructuras.
Indirecta
Línea celular finita
Respiratorio
SNC
VHC
Línea celular continua
La eosina tiñe de rosa anaranjado o rojizo el citoplasma, la pared celular, el colágeno, el tejido conjuntivo y otras estructuras que rodean y sostienen la célula.
Encefalitis
Leucoencefalopatía
multifocal progresiva
HBcAb
ayuda a identificar diferentes tipos de células y tejidos, y a obtener información importante sobre las características, la forma y la estructura celular de una muestra de tejido. Se usa para el diagnóstico de enfermedades como el cáncer.
Sandwich
Se inicia de células o tejidos tomado directamente de un organismo, cuando se subcultiva se convierte en una línea celular
HBsAg
Captura IgM
Del RNA blanco mediante transcipción reversa se obtiene cDNA
Aquella que se obtiene con pocos pases o subcultivos (20-50)
se emplea una RNA polimerasa del bacteriofago T7
VEB
Es aquella que puede subcultivarse in vitro de forma indefinida (establecida)
pueden detectarse y cuantificarse virus RNA como VIH Y CMV
mas sensibles
anticuerpos fluorescentes
VHA-M
permite la observación de estructuras específicas de las células. Esta técnica tiñe los citoplasmas, núcleos, nucléolos, vacuolas y gránulos de las células, pudiéndose distinguir incluso finas trazas de cromatina.
AntiHBs
Meningitis
Enteroviruses → RT-PCR, cultivo
VCML → Inmunología
VHS-2 → PCR
Se colorea con ella material obtenido de aparato digestivo como esófago, hígado, páncreas, vías biliares así como aparato respiratorio (esputos, lavados bronquiales y bronquioloalveolares, punciones transcarinales y de pulmón), punciones de diversos órganos (tiroides, glándulas salivales, mama, abdominales, tejido linfático), líquidos de cavidades (asscítico, pleural, pericárdico y otros) líquido céfalo raquídeo.
PCR
VHS -1
VVZ
VEB
CMV
EQUIPO 7
Integrantes
González Tovar Wendy Magali
Medina Sánchez José Francisco
Martínez Robles Ángel Emmanuel
Vázquez Nieto Yetzelzin Carolina
De la Cruz Tolentino Diana Julissa
Arboviruses → Inmunología, RT-PCR
Rabia → Histología, AF
VIH → Histología, RT-PCR
Fiebre hemorrágica → ME, AF, cultivo
Reacción antígeno-anticuerpo, la cual se hace visible por medio de un colorante fluorescente incorporado al sistema.
Paperas
Sarampión
VJC PCR, histología
Rinitis, coriza
Cultivo, AF, EIA
VSR
Influenza
Cultivo, AF
Adenoviruses
Parainfluenza
Se usa en la aglutinación, la precipitación y la fijación del complemento; los anticuerpos fluorescentes pueden ser seleccionados como el cuarto procedimiento, más importante en el laboratorio clínico.
Cultivo
Rhinoviruses
Coronaviruses → ME
Enteroviruses → RT-PCR, cultivo
Faringitis
Adenoviruses → Cultivo, AF
VHS → Cultivo
VEB → Inmunología
Enteroviruses → RT-PCR, cultivo
Gatrointestinal
Diarrea
Croup
VSR → Cultivo, AF, EIA
Parainfluenza → Cultivo, AF
Rotavirus → EIA
Adenovirus → EIA
Norwalk ME
Astrovirus ME
CMV → Histología, cultivo
Bronquiolitis
Cultivo, AF, EIA
Parainfluenza → Cultivo, AF
Influenza
VSR
Ocular
Neumonía
Conjuntivitis
Cultivo, AF, EIA
VSR
Keratoconjuntivitis
Influenza
Coriorretinitis
Cultivo, AF
Parainfluenza
Adenoviruses
Adenoviruses → Cultivo, AF
Cardíaco
Enteroviruses → Cultivo, RT-PCR
Miocarditis,
pericarditis
Enteroviruses RT-PCR, cultivo
Adenoviruses → Cultivo, AF
HSV→ Cultivo, AF
VZV → Cultivo, AF
Urogenital
PCR
Enteroviruses
CMV → PCR
VZV → PCR
BK
Adenoviruses (Tipo 11)
VPH → Captura híbrida,
histología
Molluscum
contagiosum → Histología
Adenoviruses → Cultivo
Hepático
Hepatitis
VHA→ Inmunología
VHB→ Inmunología, EIA, cDNA, PCR
VHC→ Inmunología, RTP-CR
VHD→ Inmunología
VHE→ Inmunología, ME
CMV→ Histología, cultivo, AN
VEB→ Inmunología
Parvovirus→ B19 PCR, inmunología, histologia
Cutáneo
Rash vesicular
Rash
maculopapular
AF, cultivo, PCR
VHS
VVZ
Enteroviruses --> RT-PCR, cultivo
Poxviruses --> Cultivo, ME,
Inmunología
Enteroviruses --> RT-PCR, cultivo
Adenoviruses --> Cultivo
Sarampión --> Inmunología, cultivo
Rubéola--> Inmunrología, cultivo
VHH-6 PCR
Parvovirus B19 PCR, inmunología : :