Please enable JavaScript.

Coggle requires JavaScript to display documents.

TÈCNIQUES DE PCR - Coggle Diagram

- - - - 94-95ºC
    - - 50-65ºC (depèn de Tm encebadors)
    - - A la Tª òptima de l’enzim utilitzat (Taq a 72ºC)
  - - - 2 productes no desitjats (2x1) i 0 productes desitjats
    - - 4 productes no desitjats (2x2) i 0 productes desitjats
    - - 6 productes no desitjats (2x3) i 2 amplicons
    - - 8 productes no desitjats (2x4) i 8 amplicons
    - - PRODUCTES NO DESITJATS: 2n
        AMPLICONS: aprox. 2ˆn
- - - - Agents fluorescents intercalants
    - - Sondes d'hidròlisi o TaqMan
      - Balises moleculars
      - Sondes FRET
  - - - Quantificació absoluta
      - Quantificació relativa
- - - - Absència o baixa concentració:
        inactivitat de l’ADN-polimerasa
      - Alta concentració: menys
        fidelitat de replicació
    - - Els 4 dNTP han d’estar en la mateixa concentració.
        Usats com substrat per l'ADN-pol
    - - Cada encebador ha d’estar en la mateixa concentració
    - - L'elecció depèn de la fidelitat que es requereixi, la longitud del fragment
        que s’amplifica i la seqüència que s’amplifica
    - - S’ha de tenir en compte la qualitat i la quantitat
    - - Es poden afegir potenciadors de la PCR que augmentin el rendiment de la reacció o disminueixin l’aparició de productes no desitjats.
    - - Control positiu i contrl negatiu mostres
  - - - 1 banda
      - Fals positiu? Control negatiu per detectar possible contaminació
    - - Absència banda
      - Fals negatiu? Control positiu per detectar si algun reactiu no funciona bé