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LAS TÉCNICAS DE PCR - Coggle Diagram
LAS TÉCNICAS DE PCR
6.1. Reacción en cadena de la polimerasa
Permiten
Amplificar varios fragmentos distintos en una única reacción
Amplificar varios fragmentos de ARN
Cuantificar la concentración de una molécula de ácido nucleico
Ventajas
Técnica de detección
Técnica de amplificación
6.3. PCR a tiempo final
PCR estándar o convencional
Mezcla de reacción
Otros aditivos y potenciadores
ADN molde
ADN polimerasa
Cebadores
Desoxinucleótidos trifosfato
Cloruro magnésico
Preparación de las muestras
Mezcla <máster>
Control positivo o negativo
Ajuste del volumen de reacción
Programación del termociclador
Análisis de los productos amplificados (positivo o negativo)
Modalidades de la PCR estándar
PCR de grandes fragmentos
PCR de alta fidelidad
PCR con inicio en caliente
PCR de grandes fragmentos
PCR múltiple
RT-PCR
PCR anidada
6.2. Bases teóricas de la PCR
Cebadores o primers
ADN polimerasas termoestables
Características
Temperatura óptima
Mantener su actividad polimerasa
El ciclo básico de una PCR
Desnaturalización
Hibridación
Extensión
Productos de amplificación de la PCR
Segundo ciclo de PCR
Tercer ciclo de PCR
Primer ciclo de PCR
Cuarto ciclo de PCR