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Biosesori - Coggle Diagram

- - - - biosensori pizoelettrici sono dispositivi che utilizano cristalli, come il quarzo, che vibrano sotto l'influenza di un campo elettrico. la frequenza questa oscillazione dipende dal loro spessore e taglio.
      - altri usano l'oro per rilevare all'angolo specifico al quale vengono emesse le onde elettroniche (plasmodi di superficie) quando la sostanze è esposta alla luce laser.
        
        la variazione di frequenza è proporzionale a la massa di materia assorbito. è possibile discriminare in base alle vibrazioni
- - - - la parete della cellula del lievito limita la permeabilità e le grandi molecole non riescono a passare facilmente. quindi se un viene espresso un ligiando per GPCR più grande di 70\90 residue amminoacidi c'è il rischio che non entri
        nel caso del gonadotropina corionica umana essa è costituita da due subunità( 92 e 145 amminoacidi) per risolvere il problema il gene CPW2 codifica per unapare senza un mannoproteina e ne aumenta ala permeabilità
  - - - la loro attività è data dall'inibizione del acetilcolinesterasi( addetta all'idrolisi del neuro trasmettitore dell'aceticolina) nelle giunzioni neuronali
    - - L'acetilcolinesterasi di topo AChEH è stata espressa nel lievito Kluyveromyces lactis. L'attività AChEH era rilevabile nelle cellule intatte mentre era assente nei terreni di coltura. I dati sul trattamento con glucanasi e sulla microscopia immunoelettronica hanno indicato che l'AChEH è ancorato alla membrana plasmatica e che la segnalazione GPI del topo è compatibile con il macchinario di targeting per K. lactis. L'AChEH è stato anche espresso in un ceppo di K. lactis recante un allele inattivato di KlPMR. Questo mutante mostra cambiamenti nella glicosilazione proteica e nella struttura della parete cellulare. L'attività AChEH rilevata nelle cellule Klpmr1Δ era più del doppio superiore a quella osservata nelle cellule wild-type. La combinazione dell'espressione e dell'ancoraggio AChE con le caratteristiche del ceppo Klpmr1Δ di K. lactis ha portato le cellule di lievito a mostrare un'elevata attività AChE. Questo potrebbe essere considerato come una nuova unità di rilevamento da impiegare per rilevare gli inibitori dell'AChE come pesticidi
        
        una fonte economica e stabile di attivita' AChE facilmente accessibile al substrato e/o agli inibitori
        
        costruzione di “unita'-sensori” per la rilevazione di contaminanti ambientali – biosensori attuali basata su AChE purificata immobilizza
- - - - è stato eseguito un test controllo assieme all'esperimento si sono cercate le differenze
        La generale diminuzione della luminescenza dopo l’innalzamento a 2h riflette inibizione di crescita e/o metabolismo. Dopo acquisizione ogni singolo dato di luminescenza viene quindi normalizzato per il livello di densità cellulare in ogni spot. Confronto tra A e B individua i segnali aumentati o ridotti in risposta al trattamento
        
        Con questo approccio vengono individuati 12 operoni up-regolati, 10 vengono ritrovati in esperimenti indipendenti in coltura liquida; 6 di questi rappresentano 6 unità di trascrizione che non erano note partecipare alla risposta SOS indotta da danni al DNA
        
        L'applicazione di metodi indipendenti per l'analisi trascrizionale dell'intero genoma è utile perché ci sono vantaggi e svantaggi di ciascuno.
        
        Gli array cellulari di geni reporter superano alcune limitazioni nella tecnologia degli array di DNA. Una di queste limitazioni è la capacità di distinguere l'espressione di geni strettamente correlati a causa dell'ibridazione incrociata. Gli array di reporter con un costrutto separato per ciascun promotore non devono affrontare questa limitazione.
        
        Il requisito per l'isolamento e l'ibridazione dell'RNA per ogni punto temporale limita la fattibilità di analisi dettagliate del corso temporale della cinetica con matrici di DNA. L'analisi dell'array cellulare che riporta l'attività del promotore non dovrebbe avere questa limitazione, poiché tutti i ceppi utilizzano lo stesso mRNA.
        
        Un vantaggio significativo nell'utilizzo di un array reporter bioluminescente è che le analisi cinetiche vengono facilmente eseguite raccogliendo nel tempo tutte le immagini desiderate di un singolo array.