Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
protocolo para toma y envío de muestras al laboratorio - Coggle Diagram
protocolo para toma y envío de muestras al laboratorio
TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS DE HECES PARA ESTUDIOS DIAGNOSTICOS DE V. cholerae
El objetivo principal es el de mantener la viabilidad de las bacterias que se encuentran en la muestra y de procurar el buen manejo de la misma.
PROCEDIMIENTO
Asegurarse de que la persona defeque en un recipiente aparte (bacinilla) cuidando que la muestra no se mezcle con orina.
Tomar una parte de la muestra en un recipiente estéril de boca ancha y tapa rosca.
Rotular el frasco colocando el nombre del paciente, edad y fecha de recolección.
Introducir la(s) muestra(s) en una funda plástica y cerrarla evitando que se derrame y se mezcle con otras muestras.
Colocarlas en una caja, rodeándolas de papel picado asegurando que los recipientes no se muevan durante el transporte.
Adjuntar los formularios en donde constará nombres y apellidos de los pacientes, procedencia, fecha de toma de la muestra, nombre y teléfono de la persona que hizo la toma.
Sellar la caja y colocar un rótulo a un costado indicando “Peligro, Muestra Biológica” y una flecha indicando la posición “Hacia Arriba”, de manera que el transporte se haga de esa forma.
Transportar las muestras rápidamente, antes de que transcurran 2 horas de su emisión. Luego de ese tiempo la muestra no será útil.
ENVIO DE MUESTRA EN MEDIO DE TRANSPORTE
Se utilizará en caso de que la muestra tarde más de 2 horas en llegar al laboratorio. Puede usarse para hisopados fecales (introduciendo el hisopo directamente en la muestra tomando una parte de ella) o para hisopados rectales (toma de la muestra introduciendo el hisopo a través del ano del paciente).
PROCEDIMIENTO
Tomar con un hisopo estéril parte de la muestra.
Introducir el hisopo en el medio de transporte Cary Blair, cuidando de que el algodón quede 2 cm por debajo de la superficie y sin perforar el fondo del medio de transporte.
Romper la parte del mango que tocó nuestros dedos para evitar fuentes de contaminación externa.
Cerrar bien el tubo y rotularlo con el nombre del paciente.
Colocar el (los) tubo(s) en una caja, rodeándolos con papel picado para evitar que se rompan durante el transporte.
Adjuntar los formularios de pedido en donde constará los nombres y apellidos de los pacientes, procedencia, edad, procedencia y nombre de la persona que tomó la muestra.
Sellar la caja y rotularla con un papel que diga “Peligro Muestra Biológica” y una flecha indicando la posición en que debe viajar la caja.
No es necesario refrigerar las muestras. Enviarlas lo antes posible a su laboratorio de referencia.
BUSQUEDA DE V. cholerae POR LABORATORIO
En caso de muestra entera se trabaja directamente con ella; en caso de recibir un medio de transporte Cary-Blair se deberá proceder de la siguiente manera
Sacar el hisopo del tubo de transporte tomando en cuenta las normas de bioseguridad para evitar el contagio del personal y/o contaminación de la muestra.
Introducir el hisopo en un tubo que contenga unos 2 ml de solución salina estéril.
Agitar el tubo para obtener una suspensión homogénea de la muestra contenida en el hisopo. Esta suspensión nos servirá para nuestra investigación
Sacar el hisopo y colocarlo en su tubo de transporte original.
Anotar las características macroscópicas de las heces en caso de recibir una muestra entera, posteriormente:
Colocar una gota de la muestra entre porta y cubreobjetos para realizar el estado fresco verificando la motilidad en “vuelo de moscas”.
Realizar la coloración Gram (bacilos gramnegativos en forma de “coma”). A partir de la muestra entera (líquida) o de la suspensión sembrar un agar T.C.B.S. y una gelosa alcalina (ver preparación en anexos) e incubar las cajas durante 18 h a 37º C.
Verificar la presencia de colonias sospechosas en T.C.B.S. (amarillas, cremosas, brillantes, de bordes regulares). En la gelosa alcalina las colonias se presentan redondas, transparentes, de bordes regulares.
Realizar la prueba de oxidasa a partir de la gelosa alcalina (posibilidad de resultados falsos negativos si se la realiza a partir del TCBS).
En caso de epidemias se puede realizar la prueba con los antisueros directamente a partir de la gelosa alcalina. Utilizando para ello el antisuero polivalente O:1 y el antisuero O:139 en caso de negatividad del primero. Realizar las pruebas bioquímicas para descartar posibles reacciones cruzadas.
Si nos encontramos en período endémico, con las colonias oxidasa positivas realizar una galería bioquímica convencional a partir de las colonias de la gelosa alcalina. O en caso de disponer del recurso, utilizar las galerías comerciales.
En caso de requerirse un enriquecimiento se procederá a sembrar con la muestra entera un tubo de agua peptonada alcalina (preparación ver en anexos) e incubarlo por 6 horas. Luego de este tiempo y sin agitar el tubo, tomar una muestra del tercio superior del medio y sembrar un TCBS, una gelosa alcalina y un nuevo tubo de agua peptonada Procedimientos para la identificación de Vibrio cholerae en el laboratorio de microbiología 2010 4 alcalina. Estos pasos se pueden repetir hasta por 3 ocasiones (3 fases de enriquecimiento) y proceder de igual manera con las colonias sospechosas.
