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ENSAIOS IN VITRO - Coggle Diagram
ENSAIOS
IN VITRO
Avaliação do Potencial de Irritação Ocular
HET-CAM
Avaliar semi-quantitativamente o potencial irritante de um ingrediente (produtos solúveis, emulsões, géis e óleos), sobre a membrana córioalantóide de ovo embrionado de galinha, no décimo dia de incubação
É observado os efeitos irritantes (hiperemia, hemorragia e coagulação) após 5 minutos da aplicação do produto puro ou diluído
BCOP
Avaliar quantitativamente o potencial irritante de um ingrediente após aplicação sobre a córnea isolada de bovino ou olho isolado de galinha por meio da medida da opacidade e da permeabilidade
RBC
Quantificar e avaliar os efeitos adversos dos tensoativos sobre a membrana plasmática das hemácias, além do resultado da hemólise e da oxidação da hemoglobina
Citotoxicidade pelo método de vermelho neutro NRU
É avaliada utilizando-se uma cultura de células SIRC CCL 60 ou outras, adicionadas do corante vital vermelho neutro
É empregado para todo tipo de formulação, exceto aquelas que possuam propriedades fixadoras, como as formulações alcoólicas
Citotoxicidade pelo método MTT
É avaliada com a ajuda de um corante vital, MTT ou 3-(4,5 dimethyl thiazole-2yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide
Os parâmetros de avaliação observados são a porcentagem de morte celular e a concentração do produto que inibe 50% do crescimento celular (IC50)
Não aplicável a produtos insolúveis em água
Avaliação do Potencial de Irritação Cutânea
Epiderme Reconstituída
É usado como substitutos do teste de Draize ou como procedimento de screening antes de se executar o teste em animais
Teste de corrosividade
Aplicar o produto sobre uma unidade de epiderme humana reconstruída
A viabilidade celular é avaliada pela medida da atividade mitocondrial, através do corante MTT que forma um precipitado azul (formazan) sobre as células viáveis, quantificado por espectrofotometria
Teste de Resistência Transe-pidermal (TER)
Avaliação da resistência elétrica em pele isolada de rato, através de aparelhos específicos
Avaliação do Potencial Fototóxico
Teste de fototoxicidade
É uma resposta clara depois da primeira exposição da célula com agentes químicos e posterior exposição à irradiação
Não existem testes
in vitro
para avaliação do risco alergênico e fotoalergênico
É realizado a comparação da citotoxicidade de um agente químico testado com ou sem exposição adicional a doses não tóxicas de luz UVA
É expressa na determinação da dose dependente que reduz o crescimento celular (linhagem 3T3) utilizando um corante vital (vermelho neutro)
A concentração de um agente químico testado reflete a inibição da viabilidade celular em 50% (IC50)
Avaliação da Permeação e Retenção Cutâneas
É avaliar
in vitro
a permeação cutânea e retenção cutânea de uma molécula ativa
È obtida a partir da pele da orelha do porco ou pele humana proveniente de cirurgia plástica
Permeação cutânea
Trata-se de uma interação físico-química entre dois sistemas (produto x membrana de absorção) modulados por uma barreira (camada córnea)
A presença de adjuvantes na formulação como promotores de absorção cutânea e veiculação de ativos em sistemas de liberação influenciam o grau de penetração/permeação cutânea do ingrediente
A penetração/permeação cutânea dependerá do tempo de contato do produto com a pele, da concentração dos ingredientes estudados e da área de contato
Os estudos devem ser realizados em modelo de pele íntegra
Experimentos de permeação in vitro são realizados com o uso de células de difusão, chamadas de célula de Franz
Os resultados obtidos podem ser considerados para o estudo dos mecanismos de alergia e irritação cutânea