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OBSERVACIÓN Y SIEMBRA DE MATERIAL CLÍNICO, AISLAMIENTO DE DERMATOFITOS DE…
OBSERVACIÓN Y SIEMBRA DE MATERIAL CLÍNICO
Realizar una preparación de las escamas de piel, uñas y pelos
Colocar una pequeña parte en un portaobjetos
Adicionar unas gotas de KOH al 20%
Calentar levemente en el mechero
Observar al microscopio
Examinar escamas epidérmicas o pelos con KOH al 20% o líquido de Berlesse y pelos con microscopía y con tricoficia
Sembrara muestras clínicas de escamas, pelo y uñas en medio Sabouraud y Microbiotic
Colocar un poco de material clínico
Incubar a 28°C por 3 semanas
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AISLAMIENTO DE DERMATOFITOS DE SUELO
Método de Vanbreusenghem
El "anzuelo" (pelos humanos, de animales, plumas de aves, alas de insectos, etc.) debe ser esterilizado envuelto en papel y en autoclave (15-20 min a 115°C)
La tierra debe ser colectada en frascos estériles, anotando lugar y fecha
Colocar la tierra en una caja petri estéril, hasta la mitad y cerrar la caja
Dejar a temperatura ambiente, observando periódicamente
En caso de crecimiento, retirar los pelos con crecimiento fúngico y examinarlos con una gota de azul algodón lactofenol
Si se sospecha de dermatofito aislar los hongos queratinofílicos en tubos de Agar Sabouraud
PRUEBA DE PERFORACIÓN DE PELOS "IN VITRO"
Colocar pequeños fragmentos de cabello esterilizados en una caja petri
Adicionar 25 mL de agua destilada estéril y 2 ó 3 gotas de extracto de levadura al 10%
Retirar pequeñas porciones del cultivo a ser identificado y colocar en la placa sobre los pelos
Incubar a 25°C por 4 semanas
Periódicamente retirar pequeños fragmentos de pelo y examinar al microscopio con azul algodón lactofenol
Las pruebas son negativas cuando las perforaciones no son observadas después de 28 días de crecimiento
AISLAMIENTO DE DERMATOFITOS DE UN PORTADOR SANO A TRAVÉS DE LA TÉCNICA DE MARIAT
Emplear un trozo de alfombra de 5x5 estéril y frotar la parte de la piel afectada
Colocar la alfombra en caja petri con medio Mycobiotic
Incubar a 28°C
Retirar la alfombra después de 24hrs de incubación
Continuar con la incubación hasta por 3 semanas mínimo, antes de descartarla como negativa
En caso de crecimiento y para la identificación del hongo; realizar pruebas de observación directa y siembra en placas