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VALIDACIÓN DE TÉCNICAS PARA DETECCIÓN DE SANGRE, SANGRE HUMANA Y GRUPO…
VALIDACIÓN DE TÉCNICAS PARA DETECCIÓN DE SANGRE, SANGRE HUMANA Y GRUPO SANGUÍNEO ABO EN DIFERENTES SOPORTES Y CONDICIONES CON FINES FORENSES
MUESTRAS, SOPORTES Y CONDICIONES
Manchas patrón con muestra conocida
Evaluar efectividad de procedimientos
Punción venosa
Tubo anticoagulante EDTA
Sobre algodón, tela, seda, lino, satín
Diferentes soportes
Temperatura, tiempo, contaminantes y diluciones
Analizar la sensibilidad de la técnica
-20°C, 4°C, 37°C, y 60°C
24 hrs, 1semana, 1 mes
TEST DE PIRAMIDÓN, FENOLFTALEINA, LUMINOL
Preparamiento de muestras
Tubos de ensayo de 16x100 mm
Marcados con el número de radicación del laboratorio
Un fragmento de 0.5 x 0.5 + 1 ml de solución salina
Solución salina al 0.85%
Dejar por tiempo necesario para separar la mancha del soporte
Test de Piramidón
3 gotas de la muestra + 3 gotas de reactivos
Se notará cambio de color
Color violeta (+), sin color (-)
Interferencia de sustancias similares a la sangre
Para evaluar falsos positivos se hicieron manchas sobre tela de algodón
Frutas
Banana, Cereza, Ciruela, Durazno, Fresa, Limón, Mandarina, Manzana, Melón
Verduras
Cebolla, Rábano, Papa, Espinaca, Aguacate, Frijol rojo, Repollo, Zanahoria
Otras sustancias
Vino tinto, Salsa de tomate, Café, Gelatina, Óxido
Fluidos biológicos
Saliva y Orina
Test Fenolftaleína y Luminol
Método descrito por Cox, M en 1991
Fenolftaleína
Método descrito por Castello, A et l. en 2002
Luminol
Manchas lavadas
4 manchas sobre tela de algodón
Lavado con agua únicamente
Lavado con agua y jabón
Lavado con agua y blanqueador
Adicionado con aceite de cocina
TEST DE TAKAYAMA
Muestras, soportes y condiciones
Muestras por punción venosa en tubo con EDTA
Muestras sobre Algodón, Seda, Lino, Satín
Temperatura: -20°, 4°, 37°, 60°
Periodos: 24h, 1 semana, 1 mes
Ambientes: cerrados, abiertos, tierra negra
Sensibilidad de la prueba
4 grupos sanguíneos
A, B, AB, O
Diluciones
1/100, 1/500, 1/1000, 1/5000, 1/10000
Test
Con bisturí: raspar la mancha para obtener pequeñas escamas
Colocarlas entre lámina y laminilla
Agregar reactivo
Reposar 10-20 min
Observar a 10x y 40 x
DETERMINACIÓN DE SANGRE HUMANA EN MANCHAS. INHIBICIÓN DE LA AGLUTINACIÓN
Muestras, soportes y condiciones
Las mismas que en Takayama
Sensibilidad de la prueba
Igual a Pramidón
Prueba de Inhibición de la aglutinación
Titulación con Coombs
Seleccionar 2 diluciones para mostrar mejor lectura
Muestra pretratada: En contacto con diluciones escogidas y glóbulos rojos snsibilizados
Controles de sangre humana, animal y solución salina