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Tecnicas de Biologia Molecular - Coggle Diagram
Tecnicas de Biologia Molecular
Fraccionamiento Celular
Etapas
Centrifugación Diferencial
Definición
Centrifuga el homogenato y obtiene distintas fracciones
Fracciones
Mitocondrial
Mitocondria y Peroxisomas
Lisosomal
Microsomica
RER, REL, MP y Golgi
Sobrenadante
Citosol
Nuclear
Centrifugación Analitica
Ve el coeficiente de Sedimentación (S) de cada organela
Homogeneización del producto obtenido por biopsia
Producto Homogenato
Definición
Tecnica de Estudio de Organelas
Etapas Generales para estudiar ADN
Fraccionamiento Celular
Corte
Utiliza Enzimas Endonucleasas de Restricción
Reconocen Sition Criticos/ Restricción
Poseen extremos
Romos
Son procesados por Linkers
Se vuelve Pegajoso
Pegajosos/Cohesivo
Lectura Palindrica de Secuencias Especificas
Obtención de la Amuestra
Separación de Fragmentos
Filtro/ Electroforesis
Separa por tamaño
Identificación de los Fragmentos
Utiliza Sondas
Fragmento de ADN conocido y marcado
Clonage
PCR
Principales Tecnicas
Southern blot
1 Proceso
1 hasta el 5 de las etapas
Finalidade
Identifica Mutación en Sitio de Restrición
Ident. Mutación Dinamica
Polimorfismo Fragmento de de Restrición (Paternidad)
Identificar fragmento de ADN
PCR
Proceso
1 al 5 de las etapas
Clonage
Saca el plasmido de una Bacteria
Une Fragmento al Plasmido
Devuelve a la bacteria
Fragmento se reproduce con la bacteria
Ciclo de cambios de temperatura
Tipos
rtPCR
Proceso de PCR aplicado en Retrovirus
qPCR
Cuantitativo
PCR Convencional
Solo sirve para mutaciones conocidas
Estudio de Proteinas
Inmunohistoquimica
Identifica Ubicación de la Proteina
Western Blot
Cuantifica la Proteina
Northern Blot
Cuantifica ARNm
Sirve para Splicing Alternativo
Secuencias de ADN (Stinger)
Identifica mutaciones desconocidas
Estudia cada Base
Tipos
Convencional
Alta Resolución
Solo utiliza exones de ADN codificante
Mas rapido
6.RFLP
Huella Dactilar Genica
Polimorfismo (Microsatelites)
Repetición (Variable)
GWAS
Estudio de asociación de Genoma Completo
Identifica Polimorfismo de Nucleotido Unico
Aumenta Probabilidad de desarollar algun problema multifactorial (Ej: Adcción)
Cromosomicas
Se hace al M.O
Evalua forma, cantidad y tamaño
Cromosomopatias
Tipos
Cariotipo Convencional
Cromosomopatias numericas
Cariotipo bandeado
Cromosomopatias estructurales
FISH
Sondas Fluorescentes al cromosoma
Identifica Cromosomopatias
Traslocaciones
Deleciones
Inversiones
Numericas
Microdeleciones
Tipo Especial
HCG (Array)
FISH mas sofisticado
Identifica Microdeleciones y Adiciones