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Practica 10: " Pruebas de sensibilidad a antimicrobianas"., José…
Practica 10: " Pruebas de sensibilidad a antimicrobianas".
Materiales
Pinzas de disección
Mechero de bunsen
Puente de tinción
Cronometro
Hisopos estériles
Colorantes estériles
Cajas Petri con agar Muller-Hinton
Discos de papel filtro impregnados con quimioterapéuticos
Frascos con alcohol
2 tubos con solución salina fisiológica
Tubo 0.5 de la serie Mac Farland
cepas en placa de
Escherichia coli
y
Staphylococcus aureus
Gradilla
Portaobjetos
Microscopio
Regla graduada
Método
1.- Tinción de Gram
Realizar una tinción de Gram de una colonia característica de
E.coli
y
S. aureus
2.- Preparación del inoculo
Tomar varias colonias de
E.coli
y suspenderla en un tubo con SSF homogenizando con movimientos suaves.
Comparar la turbidez de la suspensión con la turbidez del tubo 0.5 de Mac. Farland.
Ajustar la turbidez si es necesario adicionando una colonia mas
Hacer el mismo procedimiento con la cepa
S. aureus.
3.- Inoculación de las placas de Mueller - Hinton
Humedecer el hisopo en la suspensión de la cepa de
E.coli
y exprimir en las paredes del tubo.
Inocular la placa de agar Mueller - Hinton sembrado en toda la superficie del agar con el hisopo y secar la placa entre 3 a 5 minutos.
Colocar los sensidiscos sobre la superficie del agar con las pinzas previamente flameadas con el mechero.
incubar las placas a 37°C durante 24 horas
Medir si hay inhibición alrededor de los sensidiscos y dar interpretación.
José Alberto Valenzuela Ochoa.
