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IDENTIFICACIÓN DE LEVADURAS - Coggle Diagram
IDENTIFICACIÓN DE LEVADURAS
IDENTIFICACIÓN MEDIANTE CRITERIOS MORFOLÓGICOS
Observación macroscópica
Se observa el aspecto de las colonias de levaduras al crecer en los diferentes medios de cultivo.
Medio habitual para levaduras: cultivo en SDA
En este cultivo las colonias suelen ser:
Planas o ligeramente convexas
De consistencia cremosa y olor dulzón
Pueden tener textura lisas o rugosas
Lo más habitual es que sean de color blanquecino
Observación microcópica
Para estimular la formación de estructuras y permitir su visualización se aplican diversas técnicas:
Visualización de hifas y esporas
La formación de pseudohifas o hifas verdaderas, o de los distintos tipos de esporas que podemos encontrar en las levaduras es una característica morfológica que permitirá:
La identificación definitiva o presuntiva de algunas especies de levaduras.
Prueba del tubo germinal o de filamentación precoz
Tubo germinal
Es una extensión filamentosa de levadura, sin estrechamiento en su origen.
Su
anchura
suele ser la mitad de la que tiene la célula progenitora
Su
longitud
es tres o cuatro veces mayor
Solamente la
Candida albicans
es capaz de producir tubos germinales.
IDENTIFICACIÓN MEDIANTE CRITERIOS INMUNOLÓGICOS
Se basan en detectar si en una muestra o en una colonia aislada está presente un determinado antígeno, característicos de una especie patógena.
Las más utlizadas son:
Aglutinación de partículas de látex
Existen varios sistemas comercializados
Consiste en mezclar sobre una superficie lisa una alícuota de la colonia sospechosa o de la muestra biológica con unas gotas de una suspensión de partículas de látex recubiertas con anticuerpos específicos.
El conjunto se somete a rotación
Si el antígeno sospechoso está presente en la muestra, las partículas de látex aglutinan.
Técnica ELISA
Para el diagnóstico presuntivo rápido de Candidiasis sistémica, es útil detectar en el suero de los pacientes el antígeno manano.
un componente de la pared celular de Candida
IDENTIFICACIÓN MEDIANTE CRITERIOS PROTEÓMICOS
Técnica MALDI-TOF
Se basa en generar el espectro de masa de microorganismos presente en una muestra
Y compararlo con los espectros de referencia almacenados en la biblioteca del sistema.
IDENTIFICACIÓN MEDIANTE CRITERIOS BIOQUÍMICOS
Pruebas para la identificación de
Candida
.
Candida
Es un género muy extendido y de gran interés
Provoca diversos tipos de micosis cutáneomucosas bastante frecuentes
Es responsable de muchas micosis sistémicas, que pueden comprometer la vida de pacientes inmunodeprimidos
Medios cromogénicos
Un
sustrato cromogénico
y un
indicador enzimático
hacen que una levadura sembrada en el medio formen colonias de un color u otro
Dependiendo de cual sea su actividad enzimática.
Medios fluorogénicos
Se basan en la incorporación de un componente en el medio que, al ser hidrolizado por una enzima fúngica
Produce un metabolito fluorescente que se puede ver iluminando el medio con luz UV.
Sistemas rápidos de identificación
Uno de los más habituales que proporciona en pocos minutos una identificación presuntiva de
Candida albicans
BactiCard Candida
Consta de una tarjeta con dos círculos rotulados, que son dos sustratos específicos para las enzimas
Fluido rehidratante
Dos reactivos reveladores
Varilla aplicadora
Si el resultado de los dos test (PRO y MUGAL) es positivo, el hongo presente es
Candida albicans
, ya que es la única especie que presenta estas dos enzimas
Pruebas para identificación de Crytococcus
Crytococcus neoformans
Es un hongo que provoca infecciones pulmonares y meníngeas
Se trata de una levadura que tiene una gruesa cápsula muy visible al microscopio, mediante una tinción con tinta china.
Para la confirmación del diagnóstico tras la observación se suelen practicar pruebas.
Las más comunes:
Prueba de la ureasa
Prueba de nitrato reductasa
Prueba de fenol oxidasa
Identificación basada en métodos de asimilación de nutrientes: auxonograma
Es una prueba microbiológica
Permite determinar la capacidad de una levadura para asimilar diferentes nutrientes presentes en un medio de cultivo.
Para realizarla se utilizan varios medios de cultivo con diferentes carbohidratos y productos nitrogenados, que se siembran a partir de una colonia.
La respuesta obtenida en cada medio determina un perfil que posibilita su identificación.
Sistemas de identificación rápida
Permiten identificar en un único procedimiento prácticamente cualquier levadura de interés clínico
Consisten en galerías con medios de cultivo deshidratados específicos para cada prueba
El procedimiento consta de tres fases
La identificación de la levadura a nivel de especie se consigue comparando el perfil obtenido en la galería con las claves suministradas por los fabricantes
Se puede utilizar de manera:
Manual
Semiautomática
Automática