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EXTRACCIÓN DEL ADN, Identificación Forense - Coggle Diagram
EXTRACCIÓN DEL ADN
Reactivos y materiales
Material biológico: células en cultivo, tejido de biopsias, órganos o fluidos corporales.
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Centrífuga: equipo que ayuda a separar los diferentes componentes de una muestra por medio de una fuerza giratoria.
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Etanol: es un disolvente que no se mezcla con el ADN por lo tanto se usa para precipitar el ADN RNAsa: proteína (enzima) que rompe el ARN.
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Procedimiento
Se debe lisar o romper nuestras células para extraer el ADN y todos los componentes celulares libres.
Se debe degradar las proteínas principalmente las unidas al ADN y las del citoplasma usando proteasa K.
Después se separan los diferentes componentes celulares del ADN con disolventes orgánicos Posteriormente se debe precipitar con etanol y/o centrifugación .
Como el etanol precipita también al ARN (por que son polimeros muy similares) se debe colocar una RNAsa, el cual rompe el ARN con el fin de dejar solo ADN
Se inactiva la enzima de ARN con calor y despues se resuspende el ADN en agua ultra pura con el fin de manipularlo mejor
Por ultimo Cuantificación de ADN: se mide la concentración del ADN usando un equipo llamado espectrofotómetro para conocer la cantidad de ADN total de nuestro material biológico.
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Identificación Forense
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Emilio Carrillo Frías, Actividad de recuperación
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Con fines de identificación humana es importante disponer demarcadores de ADN que exhiban una alta variación entre individuos y que en conjunto permitan discriminar entre ellos.
SNPs: Los SNPs son marcadores bialélicos, es decir, sólo existen dos alelos posibles para cada locus, por lo tanto son menos informativos para pruebas forenses que un locus STR, por lo que se necesitan analizar una mayor cantidad de marcadores para alcanzar el mismo poder de discriminación que los 13 STRs utilizados por CODIS.
PCR: La reacción en cadena de la polimerasa (conocida como PCR por sus siglas en inglés, Polymerase Chain Reaction) permite amplificar más de un millón de veces un ADN obtenido a partir de una región seleccionada del genoma, siempre y cuando se conozca una parte de su secuencia de nucleótidos.
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