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TINCIONES DIFERENCIALES T. GRAM / IDENTIFICACION…
TINCIONES DIFERENCIALES T. GRAM / IDENTIFICACION BACTERIANA
TEORIA DE LA COLORACION
FISICA
Adsorción,capilaridad y osmosis
Capilaridad
Adsorción
Absorción
osmosis
QUIMICA
Reacciones moleculares, iónicas entre colorante y estructura celular
C. BASICOS
En Bacteriologia (C de hulla)
C. ACIDOS
TIINCION GRAM
COLORANTES
sust. química capaz de reaccionar con elementos celulares
SUSTANTIVOS
Naturaleza: coloidal
Tiñe directamente la estructura
ADJETIVOS
Precisan de un mordiente para teñir
MORDIENTE
Fenómeno físico o químico, permite reaccionar al colorante con la estructura celular
BASICOS
Sales ferrosas de Al
ACIDOS
Ac. tánico
FROTIS .
IDENTIFICAR
lápiz graso, marcador cd
FLAMEAR
de d. a p.
SECAR
RECOGER
SUMERGIR
TOMAR
SECAR
EXTENDER
O
FLAMEAR
de p. a d.
FIJAR
LAVAR
FIJACION
5min
Procedimiento de muerte celular
Adhesión firme al portaobjeto
Físico y químico
CLASIFICACION DE LOS METODOS DE TINCIONES
T. SIMPLE
Sólo 1 color de colorante Ej: Azul de metileno
Observa fondo claro
T, NEGATIVA O INDIRECTA
Observa bacterias claros, relucientes sobre fondo plomizo
:red_cross:
Ej: Capsulas (tinta china o negrosina)
METODO DE BURRI
Colorante ácido no reacción con bacteria, se extiende similar al frotis de sangre
Imagen de contraste a la bacteria
T. ESTRUCTURAL
Reacciona el colorante con estructura bacteriana
Podemos teñir Flagelos, esporas, gránulos de volutina
METODO DE HIS
Observar capsulas
METODO DE NEISSER
Observa corpusculos metacromaticos (volutina)
METODO DE SCHAEFFER-FULTON
Observar esporas
METODO DE LEIFSON
Al usar colorante y mordiente hace que se vean bacterias mas voluminosas
METODO DE NEGRO SUDAN
Observar vacuolas de grasa
T. ESPECIALES
METODO DE FONTANA
Tinción del treponema pallidum, se usa impregnación argentica
Frotis
Sol. de acido tánico 5% y fenol1%
Calentar hasta que surja vapor
lavar
Aplicar colorante de fontana
Calentar hasta evaporizacion
Reposar hasta que tome color castaño
lavar
secar con papel filtro
observar
T. DIFERENCIALES
2 colorantes 1rio y 2rio permite dif a microorganismos entre si
TINCION GRAM
Observa morfología y estructura de las bacterias
POSITIVO
Mg positivo
Disminucion del diámetro de los poros del peptidoglicano
Ac teicoico
Capacidad de teñirse con VIOLETA DE GENCIANA O CRISTAL VIOLETA
Ac. muramico
NEGATIVO
Contiene poco peptidoglicano
LIPOPOLOSACARIDOS
LIPOPROTEINAS
Memb. externa
Extracción del complejo Violeta-Lugol por acción del alcohol de acetona. No retiene el color violeta
Poros amplios de pared bacteriana aun en contacto con alcohol de acetona
Se tiñe con 2do colorante FUCSINA BASICA
TINCION ZIEHL NELSEN
