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TINCIONES DIFERENCIALES TINCIÓN GRAM, Tinciones diferenciales - Coggle…
TINCIONES DIFERENCIALES
TINCIÓN GRAM
Tinción Gram
Colorantes
Sustancia química que
reacciona con elementos
celulares
Sustantivos
, tiñen directamente
a la estructura
Adjetivos
, precisan
de un mordiente para teñir
Mordiente
Permite la reacción del
colorante con la célula
Básicos
Por ejemplo: sales férricos de Al
Ácidos
Por ejemplo: Ácido
tónico
Tinciones especiales
Procedimiento
1. Frotis
2. Aplicar solución de ácido tónico
(5% y fenol (1%)
3. Calentar hasta que se desprenda valor
4. Lavar
5. Aplicar colorante de Fontana
6. Calentar hasta evaporización
7. Repasar hasta que tome color castaño
8. Lavar
9. Secar con papel filtro
10. Observar
Método de fontana
Tinción del Treponema pallidum
Se usa impregnación argentica
Tinción Estructural
Método de His
Permite observar las cápsulas
Método de Schaeffer-Fulton
Permite observar las esporas
Método de Leifson (flagelos)
Deben ser recubiertos con
suficiente colorante para
ser observados
se prepara suspención de
bacterias flagelada
lavar la superficie del tubo de ensayo
No fijar
Secar al aire
Aplicar colorante Leifson x 10min
Lavar
Secar
Observar
Método de negro sudan
Permite observar vacuolas de grasa
Método de Neisser
Permite observar corpusculos
metacromáticos (volutina)
Tinción Gram
Es un conjunto de procedimientos
físico-químicos, de técnica sencilla
con el uso de colorantes
Para observar la morfología y
estructura de bacterias
Su nombre se debe al
bacteriologo Danés Christian
Gram (1884)
GRAM POSITIVO
Peptidoglucano
Ácido Murámico
Ácidos teicoicos
MG+
Disminución del diámetro de los poros
del peptidoglucano
Capacidad de teñirse con Violeta
de genciana o cristal violeta
Pigmentación
violáceo
GRAM NEGATIVO
Contiene poco peptidoglucano
Lipopolisacáridos
Lipoproteinas
Membrana externa
Permitiendo la extracción del
complejo violeta-lugol por acción del alcohol
no retiene el color violeta
Poros amplios de la pared bacteriana aún
contacto con el alcohol o cetona
Se tiñe de color
Fucsina básica
Procedimiento
Frotis (muestra)
Fijarlas a las llamas del mechero
Agregar 1er colorante 2 a 3 gotas de
violeta de genciana por 3min
Enjuagar con agua
Agregar 2 gotas de lugol por 30seg a 1min
Lavar con agua destilada
Agregar 1 a 2 gotas de alcohol acetona
por 3 seg a 1min
Enjuagar con agua
Tinción de colorante, 2do colorante, aplicar 2
gotas de Safranina o fucsina básica por 1 a 3min
Este tiene dejará de color rosado-rojizo a las bacterias
Gram -
Lavar con agua
Escurrir
Observar al microscopio
Teoría de la coloración
Física
Adsorción
Capilaridad
Ósmosis
Absorción
Química
Se basa en reacciones
moleculares, iónicas
Entre el colorante y la
estructura celular
Básicos
Ácidos
Frotis
5. Identificar
El portaobjetos (lápiz graso, marcador)
6. Flamear
El asa bacteriológica y enfriar
4. Secar
Con paño
7. Recoger
Y depositar una gota de agua
destilada en el portaobjeto
3. Sumergir
En alcohol
8. Tomar
Un inoculo de una colonia
2. Secar
Con paño sin hilachas
9. Extender
La muestra en forma circular
1. Lavar
El portaobjetos
10. Flamear
El asa bacteriológica
11. Fijar
Al calor de la llama del mechero
Tinciones diferenciales
