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Nomenclatura y clasificación. - Coggle Diagram
Nomenclatura y clasificación.
Identificación de SARS-CoV-2:
Síntomas comunes
Tos seca
Falta de aire
Fiebre
Método estándar
PCR
Se conoce como
RT-PCR
Se debe hacer
Detección de virus en animales:
PASOS
HOMOGENEIZACIÓN
TRANSFERENCIA
HORNO DE FIJACIÓN
PROCESOS DE INCUBACION
HORNO DE ROTACIÓN
SABER DE DONDE VIENE LA MUESTRA
Técnicas moleculares para identificar virus y bacterias:
Identificación a nivel de especie
Métodos basados en el análisis de ADN
Basados en los análisis de los operadores ribosomales.
Secuanciación de gen 16S
Procedimiento
Amplcificación del ge 16S-ARN con cebadores comunes a todas las bacterias.
Purificación de la banda amplificada
Secuenciación por electroforesis capilar
Comparación d la secuencias obtenidas con las publicaciones en bases de datos.
16S-ARDRA
Procedimientos
Digestión con enzimas de corte frecuente
Separación por electroforesis en agarosa convencional
Amplificación del gen 16S-ARN con cebadores comunes a todas las bacterias.
Comparación de patrones de bandas con los de cepas de referencia
Basado en el análisis del genoma completo
Hibridación con ADN cromosomico total marcado
Secuenciación completa del genoma
Hibridación in situ de genes ribosomales con sondas fluorecentes(FISH)
Procedimiento
Diseño de la sonda especifica a partir de bases de datos
Marcaje de la sonda con fluorocromos
Fijación de las células sobre porta o filtro con paraformaldehido (Gram-) o etanol (Gram+)
Permeabilización de las células con lisozima.
Hibridación
Visualización mediante microscopio fluorescencia
TIPIFICACION
MÉTODOS
Basados en el análisis del genoma completo
Basados en el analisis de lso operadores ribosomales
Basados en el analisis de fragmentos concretos del genoma
TÉCNICA DE RAPD
PROCEDIMIENTO
Amplificación del ADN total por PCR en condiciones poco restrictivas (30-40°C)
Separación de los fragmentos amplificados mediante electroforesis convencional
Se utiliza un único cebador de 12-20 pb cuya secuencia es arbitraria
Diagnóstico molecular de agentes infecciosos:
PCR CONVENCIONAL
MEZCLA DE REACTIVOS
AMPLIFICACIÓN
ELECTROFORESIS
MATERIALES
PASOS
Mezcla de reactivos y aplificacion de ácidos nucleico
Electroforesis en geles de agarosa
LECTURA E INTERPRETACION
TÉCNICA ELISA
Detección de antígeno
Sencillo y rápido de realizar
Uso limitado
Menor sensibilidad
Dificultad para obtener un conjugado que reconoce directamente al antígeno
Pasos que evalúa
Fijación del antígeno a la placa
Bloqueo de la placa
Incubación con el conjugado
Incubación con el substrato
Lectura y selección de clones positivos
Técnica para cuantificar y aislar virus:
TÉCNICA DE UFP
CUANTIFICACION VIRAL POR ENSAYO DE PLACAS