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PASOS PARA PROCESAR MUESTRAS HISTOPATOLÓGICAS - Coggle Diagram
PASOS PARA PROCESAR MUESTRAS HISTOPATOLÓGICAS
Este consta de 4 pasos:
Fijación
Inclusión
Corte
Coloración
FIJACIÓN
Detiene los procesos de destrucción celular o hística
Pueden haber agentes químicos o físicos:
A. químicos como la inmersión o perfusión
Las sustancias fijadoras más comunes son:
Formol
Glutaraldehído
Tetraóxido de Osmio
Líquido de Bouin
A. físicos como el calor o el frío
INCLUSIÓN
Se realiza para que el tejido tenga suficiente firmeza al cortarse.
Para el M/O se utiliza inclusión de parafina
En el M/E se utiliza inclusión de resinas sintéticas.
Como la parafina no es soluble en agua, antes de este paso se necesita deshidratar el tejido.
La
deshidratación
se la realiza para eliminar el exceso de fijador y el agua contenida en la muestra
CORTE
Para el M/O se utiliza el micrótomo con cuchillas de acero, y permiten un espesor de la muestra de 5 a 8 μm.
Para el M/E se utiliza el ultramicrótomo con cuchillas de diamante o vidrio, y permiten un espesor de la muestra de 20 a 40 nm.
Luego del corte se realiza un baño de agua templada a 37°
El objetivo de realizar cortes tan finos es para poder ver mejor los tejidos en el microscopio
Los cortes para su observación al M/O, se montan en una lámina de vidrio llamada portaobjetos.
Al M/ E se montan en unas rejillas metálicas pequeñas que presentan perforaciones, las cuales permiten el paso del haz electrónico.
COLORACIÓN
Los colorantes son sustancias químicas capaces de teñir o aportar color a los tejidos o a los fluidos, son sales neutras que utilizan radicales ácidos o básicos
Luego sobre un portaobjeto se le agrega el colorante
Los más utilizados son: Hematoxilina y Eosina
Después se tiene que lavar con agua
Por último, se tiene que deshidratarlo de nuevo, puesto que luego se se cubre el tejido con un pegamento que no es miscible
Antes de proceder con la coloración se necesita hidratar con una serie de soluciones de alcohol
Esto se lo hace para la parafina se disuelva de los tejidos, ya que los colorantes como son acuosos no son miscibles con esta.