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Métodos diagnósticos (Microscopía y Cultivo in vitro (Métodos de tinción,…
Métodos diagnósticos
Microscopía y Cultivo in vitro
Métodos microscópicos
entre ellos
Microscopía de contraste de fases
permite examinar
Detalles internos de microorganismos
Microscopía fluorescente
mediante
Fluorocromos
Microscopía de campo oscuro
Detecta bacterias delgadas
Leptospira
Treponema pallidum
Microscopía Electrónica
Microscopía de campo claro
lentes de objetivo
Alto aumento en seco - 40x
Búsqueda de microorganismos grandes
Hongos filamentosos
Parásitos
Inmersión en aceite - 100x
Observación de bacterias y levaduras
Bajo aumento - 10 x
Para explorar muestra
útiles para identificar
Elementos fúngicos
Células bacterianas
Parásitos
Cultivo in vitro
pueden ser
Selectivos diferenciales
Agar xilosa-lisina-desoxicolato
selectivo para Salmonella y Shigella en cultivos entéricos
Agar Middlebrook
Selectivo para micobacterias
Medio de Lowenstein-Jensen
Selectivo para micobacterias
Agar inhibidor de hongos filamentosos
Selectivo para hongos filamentosos
CHROMagar
Selectivo, diferencial para bacterias y levaduras
Agar MacConkey
Selectivo para bacterias gramnegativas, diferencial para fermentadoras de latosa
Agar sal manitol
Selectivo para estafilococos, diferencial para S. aureus
Especializados
Caldo de cultivo Lim
Streptococcus agalactiae
Agar sorbitol de MacConkey
Escherichia coli O157
Agar cistina.telurito
Corynebacterium diphteriae
Agar Regan Lowe
Bordetella pertussis
Agar extracto de levadura con carbón vegetal tamponado
Legionella y Nocordia
Agar sacarosa, sales biliares, tiosulfato y citrato
Género Vibrio
No selectivos
Agar Mueller-Hinton
Estudio de susceptibilidad bacteriana
Caldo tioglicolato
Enriquecido para bacterias anaerobias
Agar chocolate
Recuperación de bacterias
Haemophilus
Niesseria gonorrhoeae
Agar dextrosa de Sabouraud
Recuperación de hongos
Agar sangre
Recuperación de bacterias y hongos
Métodos de tinción
Tinciones diferenciales
Tinción de Gram
Separa principales grupos de bacterias en grampositivas y gramnegativas
Tinción de hematoxilina férrica
Detección e identificación de protozoos fecales
Metenamina de plata
Detecta elementos fúngicos en tejidos y otros microorganismos (bacterias)
Tinción de azul de toluidina O
Microorganismos del género Pneumocystis
Tinción tricrómica
Tinción de protrozoos
Tinción de Wright-Giemsa
Detección de parásitos sanguíneos, cuerpos de inclusión víricos y por clamidias y géneros Borelia, Toxoplasma, Pneumocystis y Rickettsia
Tinciones acidorresistentes
Tinción de Ziehl-Neelsen
Tinción de micobacterias y microorganismos acidorresistentes
Tinción de Kinyoun
Tinción de micobacterias y microorganismos acidorresistentes
Auramina-rodamina
Tinción acidorresistente modificada
Tiñe micobacterias, y débilmente Nocardia, Rhodococcus, Tsukamurella, Gordonia, Crystosporidium, Isospora, Sarcocystis y Cyclospora
Estudio directo
KOH al 10%
Detección de elementos fúngicos no afectados por solución alcalina fuerte
Tinta china
Detecta Cryptococcus en LCR
Preparación en fresco
Yodo de Lugol
Mejora contraste de estructuras internas en parasitología
Tinciones fluorescentes
Tinción blanco de calcoflúor
Detecta elementos fúngicos y del género Pneumocystis
Tinción directa con anticuerpos fluorescentes
Detecta Streptococcus pyogenes, Bordetella, Franciscella, Legionella, Chlamydia, Pneumocystis, Cryptosporidium, Giardia, virus gripal, virus del herpes simple
Tinción de naranja de acridina
Detecta bacterias y hongos en muestras clínicas
Diagnóstico serológico
Inmunoanálalisis para antígenos asociados a células
Citometría de flujo con inmunofluorescencia
Análisis de población de células positivas para antígenos
Enimoinmunoanálisis -EIA-
Detección y localización de antígenos
Inmunofluorescencia
Detección y localización de antígenos
Inmunoanálisis para anticuerpos y antígenos solubles
Fijación del complemento
Cuantificación del título de anticuerpos específicos
Inhibición de la hemaglutinación
Título de anticuerpos antivíricos, serotipo de cepa vírica
Radioinmunoanálisis
Cuantifica complejos antígeno-anticuerpo
Aglutinación con látex
cuantificación y detección de antígenos y anticuerpos
Western blot
Detección de anticuerpos específicos de antígeno
ELISA
Cuantifica antígenos y anticuerpos
Técnicas de precipitación e inmunodifusión
Inmunodifusión doble de Ouchterlony
Determina relaciones entre diferentes antígenos
Inmunodifusión radial simple
Detecta y cuantifica un antígeno
Diagnóstico molecular
Detección de material genético microbiano
Detección, Amplificación y secuenciado de ácidos nucleicos
PCR en tiempo real
Cuantificación de muestras muy diluidas de ADN y ARN
PCR
Amplificación de muestras muy diluidas en ADN
RT- PCR
Amplificación de muestras muy diluidas en ARN
Southern blot
Detección y caracterización de secuencias de ADN por tamaño
ADN de cadena ramificada
Amplificación de muestras muy diluidas de ADN o ARN
Northern blot
Detección y caracterización de secuencias de ARN por tamaño
Dot blot
Detección de secuencias de ADN en solución
Hibridación in situ
Detecta y localiza secuencias de ADN en tejidos
Análisis de ADN mediante hibridación para captura de anticuerpos en solución
Amplificación de muestras muy diluidas de ADN o ARN
Análisis electroforético del ADN y polimorfismo de longitud de frafmentos de restricción
Polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción -RFLP-
Útil para distinguir cepas de VHS
Compara ARN ribosómico 16S para identificar bacterias
Comparación ADN
Electroforesis en gel de campo pulsado
Comparaciones entre cepas de estreptococos
Detección de proteinas
SDS-PAGE
Separación de proteínas por peso molecular, identifica cepas víricas y bacterianas
Espectrometría de masas con MALDI-TOF
Por medio de peso molecular distingue diferentes proteínas, análisis rápido y sensible de ADN y ARN