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Scale- down (Aplicación de proteínas farmacéuticas recombinantes…

- - - - se toman muestras de la corriente de alimentación, durante la extracción los pasos de filtración estos procesos no se necesitaban maceración
        
        en el ejemplo la cantidad soluble de proteína fueron determinados por el método de BRADFORD
        
        TOMANDO COMO EJEMPLO 2.5 O5 μL de sobrenadante con 200 μL de reactivo bradford en placas de 96 pocillos y se incubaron durante 10 min a 22°C pra posteriormente medir absorbancia a 595 nm utilizando una placa synergy HT lector (BIO Tek Instruments) , 8 diluciones de albúmina de suero bovino ((0–2000 μg mL–1)
      - Fluorescencia DsRed
        
        se midio utilizando un lector Synergy HT equipado con filtros de 530/35 nm en placas de area de 96 pocillos
      - Para determinar la cantidad de especificidad se utilizo mediante espectroscoía de resonancia de plasón superficial
        
        Biacore t 100 (GE Healthcare)para medir la antidad de unión de anticuerpo a la proteína A (Sigma-Aldrich)
    - - tabaco N.benthamiana se cultivaron en un ivierno a una temperatura de 25/22 °C día/noche con fotoperíodo de 16 h(180(180 μmol s–1 m–2;λ = 400–700 nm)
        
        Homogenización del material de la hoja
        
        Preparaciones a escala laboratorio
        
        se utiliza un istrumento Polytron PT6100 (Kinematica) y en este caso se homogeneizo 0.5 a 2.0kg de biomasa
    - - Se prueban diferentes tipos de filtros de bolsa para eliminar las partículas de a granel del homogeneizador
        
        en procesos a escala laboratorio el liquido residual se drenó de los filtros y la torta del filtro presionando manualmente para mejorar la recuperación del extracto
  - - - El número de potencia Np, se da en función del poder homogeneizador P, ρ= densidad de extracto,revoluciones de cuchilla por segundo,y db diámetro de la cuchilla .
      - TAMBIÉN SE UTILIZA EL NUMERO DE REYNOLDS
        
        En el cual ρ es la densidad del extracto,N son las revoluciones de la cuchilla por segundo, db es el diámetro de la cuchilla y η es la viscosidad dinámica
    - - la combinación de filtros inicial tenia dos inconvenientes
        
        Capacidad de filtro viable y la robustez del proceso final tanto como la necesidad de múltiples filtros que aumenta los consumibles y los costos de mano de obra y tiempo requerido para la preparación
        
        por eso se utilizo en este proceso
        
        comparar pruebas de filtración anteriores pero ahora utilizando extractos de plantas cultivadas en el suelo
        
        Desarrollar un proceso automatizado con plantas cultivadas en lana de roca utilizando cGMP y un filtrado final
        
        en este caso es importante utilizar las capacidades mas altas para extractos de plantas de lana de roca utilizando 3 configuraciones
        
        combinación del filtro inicial PB2+PC2, pdf4,90ZA05
    - - Filtro Fp de fieltro con aguja de polipropileno se utilizo para quitar la tubidez y rendimiento de proteínas
      - Filtro MNS de monofilamento de nylon produjo el filtrado mas turbio y resulto con mayor perdida de proteína tomando en cuenta ese tipo de experimento
      - Filtro original BP410 filtro de aguja de prolipropileno y el filtro FL de fieltro de aguja de poliéster fue intermedio
    - - Para determinar el enfoque teórico,el numero optimo de filtro y la profundidad de la capa
        
        un ejemplo seria la determinación de distribución del tamaño de partícula
        
        se puede realizar este tipo de cuantificación por medio de la retención expresado en la siguiente ecuación
        
        donde
        
        en el cual n =es el número total de capas ryo= es el índice de retención nominal de la capa más porosa del par, y rj = es el índice de retención nominal de la capa más fina en el par.
    - - se utilizo el filtro de PDF4 por que tiene una mayor capacidad en cual seria empleado en escala piloto
        
        las conexiones de alimentación,drenaje, ventilación regulación de la temperatura y control de nivel de llenado da a una mejor opción que el tren de tratamiento de filtración
- - - - algunos ejemplos son
        
        filtros desechables que cumplan con las buenas prácticas
  - - - se debe tener en cuenta la eliminación por clarificación para evitar medios contaminantes de cromatografía
        
        la clarificación a gran escala explota las diferencias entre solubilidad y densidad de carga y tamaño entre la proteína objetivo y las impurezas , partículas.
        
        se utilizan técnicas como
        
        microfiltros y centrifugación
        
        existen dentro de la micro filtración filtros como
        
        Un filtro de membrana final excluye partículas por encima de cierto tamaño porque este paso tiene un límite de peso molecular absoluto.
        
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