Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
HYBRYDYZACJA (DENATURACJA
fizyczne rozdzielenie dwóch nici badanego DNA i…
HYBRYDYZACJA
-
DENATURACJA
fizyczne rozdzielenie dwóch nici badanego DNA i sondy molek.-rozerwanie w.wodorowych (wzrost temp.układu, środki chemiczne, zmiana pH)
-
-
-
-
bufor hybrydyzacyjny
skład
-
formamid (wpływ na temp. topnienia, wpływ na zwiększenie specyficzności tworzenia hybryd)
-
-
-
-
HYBRYDYZACJA in situ
-
materiał wyjściowy: utrwalone na szkiełku komórki, chromosomy
rozpoczyna się wszystko denaturacją preparatu i sondy DNA, następnie jest proces hybrydyzacji i usunięcie nadmiaru niezhybrydyzowanej sondy, wszystko kończy się wizualizacja sygnału
-
Southern blot
-
polega na przeniesieniu na membranę, i później detekcji rozdzielonych elektroforetycznie cząst. DNA
materiał oczyszcza się i przeprowadzana jest fragmentacja (enzymy), później elektroforeza
membrany (transfer rozdzielonego materiału na membranę) membrany nylonowe lub pozytywnie naładowane membrany nylonowe
-
transfer (kapilarny, próżniowy, elektroblotting)
Northern blot
-
elektroforeza RNA, przeniesienie rozdzielonych fragmentów na membranę
transfer kapilarny, próżniowy, elektroblotting