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TEST ELISA (detta anche tecnica IMMUNOENZIMATICA (si basa sull'…
TEST ELISA
detta anche tecnica
IMMUNOENZIMATICA
si basa sull'
attività enzimatica
TECNICA DIRETTA
1.
micropiastre ne cui pozzetti sono adsorbiti
anticorpi
2.
si aggiunge il siero contenente l
'antigene
specifico
3.
formazione di
immunocomplessi
4.
lavaggio
per eliminare gli antigeni che non si sono legati
5.
aggiunta dell'anticorpo legato con
un'enzima
.
Formazione struttura a
sandwich
6.
Lavaggio per eliminare
anticorpi
non legati
7.
substrato per l'enzima e si misurano le sue
attività
TECNICA INDIRETTA
1.
pozzetti con
antigene
fissato
2.
aggiunta del siero con
anticorpi specifici
3.
formazione di
immunocomplessi
4.
lavaggio per eliminare
anticorpi non legati
5.
si aggiunge un
anti-anticorpo
legato ad un'
enzima
, il quale si lega all'antigene sul fondo
6.
lavaggio
per eliminare gli anti-anticorpi non legati
7.
si aggiunge il
substrato
per l'enzima e si studiano le
attività enzimatiche
per la misurazione di tali attività si usa lo
SPETTROFOTOMETRO
i
principali enzimi
sono:
perossidasi di rafano
fosfatasi alcalina