Carlo V allora, sentendosi tradito dal papa, decise di punire Roma. Infatti iniziò il sacco di Roma, un lungo assedio che durò 10 mesi, dove i Lanzichenecchi (soldati fortissimi a servizio di Carlo V) fecero una strage. Dopo numerose lotte, la guerra finì con la pace di Cambrai nel 1529, dove il papa riconobbe i territori del nord Italia, come appartenenti all' Impero di Carlo V.