Please enable JavaScript.

Coggle requires JavaScript to display documents.

([QC-12] IA (FPIA (homo IA /และ compet IA ) (วิธีการ (Ag-F (Ag w/…

- - - - Ag-F
        (Ag w/ fluorescent labelled)
        
        แย่งจับ Ab
        (Ab มีจำกัด)
        
        จับสมดุล
        วัด degree of polarization
        
        DP ขึ้นกับการหมุนของโมเลกุลของสาร
        
        ⬛️
        
        IF mlc ใหญ่(eg. Ag-F-Ab complex —>
        
        1 more item...
        
        ▪️
        
        1 more item...
        
        🔄 rotation
        
        emission
        (ก คายพลังงานแสง)
        จะอยู่ในระนาบเดียวกับ
        excitation light
        
        1 more item...
      - Ag ที่ต้องการวิเคราห์
    - - ประยุกต์
        
        เชิงคุณภาพ การตรวจหาเชื้อ เช่น เชื้อไวรัสตับอักเสบ pregnant test
        
        เชิงปริมาณ ติดตามระดับยาในเลือด ปัสสาวะ น้ำลาย เป็นต้น
    - - ยกตัวอย่าง
        หา Theophylline
        
        เตรียม catibrator
        (รู้conc)
        
        เตรียมเองไม่ได้ ต่างจาก std solution เนื่องจาก
        วิธีนี้เตรียม matrix ที่ใช้เป็น animal serum
        
        เตรียม control
        (รู้ conc )
        
        ใช้ monitor ว่า ตัวที่ตรวจวัด(analyser) และ วิธีตรวจวัด (assay) มี accuracy และ precision ที่ผ่านมั้ย
        
        ถ้า control “in range" แสดงว่า analyser ,assay ให้ผลที่น่าเชื่อถือได้
  - - - IAs may be
        
        เขิงคุณภาพ qualitative (positive or negative)
        
        semi-quantitative (estimate amount measured)
        
        เชิงปริมาณ quantitative (exact amount measured)
      - detect or quantify a specific substance, the analyte, in a blood or body fluid sample, using an immunological reaction เปนวิธีวิเคราะห์ที่ใช้หลักการ ของการเกิดปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกัน (Immunological reaction) ซึ่งเป็นRxระหว่าง Ab และ Agเกิดเปนสารประกอบเชิงซ้อน Ag-Ab complex
    - - Use for the measurement (quantitative assay) -drugs, hormones, specific proteins, tumor markers
      - Use for the detection (qualitative assay)
        -detect antigens on infectious diseases: hepatitis B virus etc.
        -Pregnancy test: detect human chorionic gonadotropin (hCG) in urine
    - - Detection and quantification
        C ➡️ a family of compounds มีกี่ตัว → ออกมาได้หมด (มีวิธีแยกสาร)
        IAs ➡️ a single molecular species จะต้องแยกสารมาก่อน ไม่มี part แยกสาร
      - Equipments
        C ➡️ use more complex equipments ซับซ้อน
        IAs ➡️ use less complex equipments ง่ายๆ
  - - - Reagent-excess Immunoassay (Non-competitive assay)
        หลักการ: ไม่จำกัดปริมาณ
        สารในการRx ภูมิคุ้มกัน
        นิยมใช้ Ab2ชนิดที่จำเพาะกับ Ag ตัวเดียวกัน เรียก Ab sandwich immunoassay > Capture Ab เคลือบผิว solid ph > detecting Ab(ติดฉลาก) > rx สมดุลจะตรวจวัด Ab1-Ag-Ab2* complex
        
        ปริมาณของ Ab1-Ag-Ab2* จะเป็น สดสวนโดยตรงกับปริมาณ Ag ที่ต้องการวิเคราะห์
      - Reagent-limited Immunoassay (Competitive assay)
        หลักการ: จำกัดปริมาณ
        สาร ในการเกิดRxภูมิคุ้มกัน
        การติดฉลาก มีทั้งชนิดที่ Ag(Ag) or Ab (Ab)
        
        Activity ของสารติดฉลากในรูป Ag-Ab cpx จะเปนสัดสวน *ผกผันกับปริมาณ/ความเข้มข้นของ Ag
        
        ใช้หาปริมาณ Ag ขนาดเล็ก เช่น steroids/drug/สารเสพติด
        
        Exp: Radioimmunoassay (RIA)
        Enzyme immunoassay (EIA)
        Fluoroimmunoassay (FIA)
      - Label-free Immunoassay
        
        Ag-Ab cpx มองเห็นด้วยตา
        
        Types: Agglutination, Precipitation
        
        Limitations: low sensitivity
        Exp: Immunoprecipitation
        
        Immunoprecipitation
        
        Agglutination
        อาศัย rx เกาะกลมุ่มแบบจำเพาะระหว่าง Ag และ Ab เกิด Ag-Ab cpx ที่มีขนาดใหญ่ สังเกตเห็นได้ง่าย
        
        🩸🩸Hemagglutination
        
        specific form of agglutination that involves red blood cells
        
        Use to identify RBC surface Ag or blood group
    - - Heterogeneous or Separation immunoassay
        
        Homogeneous or Separation-free immunoassay
        
        Exp:
        
        Enzyme-multiplied immunoassay (EMIT)
        
        Fluorescence polarization immunoassay
        (FPIA)
        
        ต้องแยก BF ออกจาก FF ❌❌
        
        ✔️✔️
        
        1 more item...
        
        สารติดฉลากจะเกิดการ ปป ไม่สามารถวัด activity เมื่ออยู่ในรูป Ag*-Ab
        
        1 more item...
        
        Separation technique: chromatographic technique, precipitation, solid phase (microtitre plate, bead, membrane)
        
        ELISA
  - - - Immunological reaction
        
        Ag- Ab. ↔️ Ag - A. Complex
        
        การตรวจวัดทำโดยการหาปริมาณของ free form ว่าปริมาณลดลง?
        หรือตรวจจาก complex
        เช่น เคลือบแอนติเจนบน solid phase (e.g. microtiter plate, tube, bead) หลังจากนั้นให้ทำปฏกิริยากับ Ab
        IF มี rx ; Ab จับ Ag >>ตรวจได้
      - ตรวจวัดการเกิด Ag-Ab interact
        
        Direct
        
        ตรวจจากตะกอน (complex)
        
        Immunoprecippitation
        
        Immunoelectrophoresis
        
        Indirect
        
        Lebel using marker (enz.florophore,radioisotope)
        
        enz Immunoassay
        
        radioimmunoassay